Acetyl-DNMT1 (K1127/K1129/K1131/K1133) ウサギポリクローナル抗体 (P26358) for IHC-P, IF/ICC, ELISA

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：DNA (シトシン-5)-メチルトランスフェラーゼ1の機能と局在

DNMT1は、DNA複製中にCpGメチル化パターンを維持し、エピジェネティックな遺伝を保証する重要なDNAメチルトランスフェラーゼです。それは半メチル化DNAを優先的にメチル化し、S期に複製フォーカスと会合しますが、G2期およびM期には複製とは独立して作用し、全体的なメチル化環境を維持します。DNMT1媒介性のサイレンシングには、HDAC2との直接的な相互作用と、ヒストン修飾および遺伝子発現を調節するコリプレッサー複合体の形成が関与します。 関連参考文献： PMID:17200670, PMID:18754681, PMID:21745816, PMID:26070743, PMID:10888872, PMID:24623306

この酵素は主に核に局在し、ユビキチン化ヒストンH3を認識するそのRFTSドメインを介して、複製フォーカスのクロマチンに動員されます。また、ヘテロクロマチン維持における特化した機能を反映して、核小体周辺領域にも局在します。 関連参考文献： PMID:12145218, PMID:24492612, PMID:29053958

DNMT1は普遍的に発現しており、特に胎児組織、心臓、腎臓、胎盤、末梢血単核球でレベルが高く、脾臓、肺、脳、小腸、結腸、肝臓、骨格筋では発現が低くなっています。 関連参考文献： PMID:10325416

DNMT1の翻訳後修飾、特にアセチル化は、重要な調節役割を果たします。この抗体が標的とするリシンクラスター（アイソフォーム1のK1127/K1129/K1131/K1133）は、ヒストンアセチルトランスフェラーゼによって修飾され、タンパク質の安定性、局在、および他のエピジェネティック因子との相互作用に影響を与える可能性のある既知のアセチル化サイト（正規配列中のK1111/K1113/K1115/K1117/K1119/K1121）に対応します。 関連参考文献： PMID:21947282, PMID:19608861

実験的ガイダンスと技術的なヒント

• このウサギポリクローナル抗体は、ヒトDNMT1のK1127、K1129、K1131、およびK1133を含む合成アセチル化ペプチドを用いて作成されました。タンパク質のアセチル化型を特異的に認識することが期待されます。
• IHC-Pの場合、エピトープを露出させるために、標準的な抗原回収法（例：クエン酸バッファー、pH 6.0による熱誘導エピトープ回収）が必要な場合があります。最適な抗体希釈倍率とインキュベーション条件は、実験的に決定する必要があります。
• IF/ICCを実行する際、4%パラホルムアルデヒドによる固定と、それに続く0.1% Triton X-100による透過処理が一般的に使用されますが、これらのステップは特定の細胞または組織系で検証する必要があります。
• ELISAを使用して、細胞溶解液または組織抽出物中のアセチル化DNMT1レベルを検出および定量できます。結合特異性を確認するために、ペプチド競合アッセイを採用することを検討してください。
• DNMT1は広く発現されているため、染色パターンを確認するために、適切な陽性および陰性コントロール（例：アセチル化状態が既知の組織または細胞株）を含めてください。
• 予測分子量は183 kDaです。検証されていないアプリケーション（例：ウェスタンブロット）に抗体を転用する場合は、それに応じてバンドサイズと特異性を検証してください。

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