アセチル化ヒストンH3 (K14) ウサギポリクローナル抗体 | Q16695 / P68431 | WB、IF/ICC、ELISA

中核製品仕様およびパラメータ

生物学的背景: アセチル化ヒストンH3 (K14) の機能と局在

ヒストンH3はヌクレオソームのコア構成要素であり、DNAをクロマチンに巻き付けて凝縮します。これにより、転写装置によるDNAへのアクセスが制限され、転写、DNA修復、複製、染色体安定性が調節されます。ヒストンの翻訳後修飾（総称してヒストンコードと呼ばれる）は、クロマチン構造と機能を調節します。

関連参考文献:

• ヒストンH3のリジン14 (K14ac) でのアセチル化は、転写活性型クロマチンに関連するよく特徴づけられたマークです。これはGCN5/PCAFなどのヒストンアセチルトランスフェラーゼによって付加され、ヒストン脱アセチル化酵素によって除去されます。K14acは、リジンの正電荷を中和し、ヒストン-DNA相互作用を減少させることで、クロマチンの緩和を促進すると考えられます。

関連参考文献: PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:16457588

• ヒストンH3は主に核と染色体に局在します。標準的なヒストンH3.1 (複数の遺伝子によりコード、SWISS P68431) は複製依存的であり、細胞周期を通じて発現します。一方、精巣特異的バリアントであるH3.1t (SWISS Q16695) は精巣細胞で発現し、精子形成の過程で標準的なH3.1と置き換わります。

関連参考文献:

• この抗体は、ヒトヒストンH3.1 (NP_003520.1) のK14周辺の残基に対応する合成アセチル化ペプチドに対して作製されました。H3.1およびH3.1tアイソフォームの両方のリジン14のアセチル化型を認識し、様々な生物学的文脈におけるK14acの研究を可能にします。

関連参考文献: PMID:19608861

実験ガイドおよび技術的ヒント

• ウェスタンブロット (WB): ヒストンH3 K14アセチル化の最適な検出には、アセチル化レベルを上昇させるために、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤（例: トリコスタチンA、酪酸ナトリウム）で処理した細胞から酸抽出によりヒストンを濃縮することを検討してください。分解能のために15% SDS-PAGEゲルを使用します。抗体特異性は、アセチル化ペプチドによる競合阻害、または野生型とHDAC阻害剤処理サンプルのシグナル比較により検証してください。
• 免疫蛍光/ICC: 細胞を4%パラホルムアルデヒドで固定し、0.1% Triton X-100で透過処理します。メタノール固定も使用可能です。ペプチド競合などの適切な対照を用いて、核染色パターンを確認してください。
• ELISA: プレートベースアッセイにおけるアセチル化ヒストンH3ペプチド検出に本抗体をご使用ください。正規化のために汎用H3抗体とペアで使用します。
• K14周辺の配列保存性が高いため、本抗体は広範囲の種に反応すると予測されますが、ヒト、マウス、ラット以外のサンプルでの検証を推奨します。

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