アセチル化ヒストンH3-K18 ウサギモノクローナル抗体 (Q16695/P68431) | WB、IHC、ChIP、ELISAで検証済み

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：ヒストンH3の機能と局在

• ヒストンH3は、DNAをクロマチンに巻き付け、凝縮させるコアヌクレオソームタンパク質であり、DNA依存性マシナリーへのアクセスを制限し、転写調節、DNA修復、DNA複製、染色体安定性において中心的な役割を果たします。 関連文献: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• 核に局在し、染色体と関連しています。 関連文献: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• 標準的なH3.1は複数の遺伝子（例：H3C1、H3C2）によってコードされ、体細胞において複製依存的に発現します。H3.1tバリアント (Q16695) は精巣細胞で特異的に発現します。 関連文献: UniProtKB Q16695

• ヒストンH3は「ヒストンコード」を構成する広範な翻訳後修飾を受けます。K18（標準H3配列では19番目）のアセチル化は、転写活性化とDNA修復に関連する重要なマークです。この修飾はHATとHDACによって動的に調節されています。この部位のアセチル化は複数の研究で報告されています。 関連文献: PMID:19608861, PMID:16267050, PMID:16627869, PMID:17194708, PMID:35939806

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトヒストンH3のK18周辺の合成アセチル化ペプチドです。得られたウサギモノクローナル抗体は、アセチル化H3K18を特異的に認識し、未修飾のK18や他のアセチル化部位とは交差反応しないことが期待されます。特異性は、アセチル化および非アセチル化ペプチド競合アッセイ、またはHDAC阻害剤で細胞を処理することによって検証してください。
• ウェスタンブロッティング（WB）では、約16 kDaの単一バンドが予想されます。アセチル化レベルを正規化するために、適切なローディングコントロール（例：全ヒストンH3またはH3 C末端抗体）を使用してください。アセチル化シグナルは、トリコスタチンA（TSA）や酪酸ナトリウムなどの脱アセチル化酵素阻害剤で細胞を処理することで増強される場合があります。
• 免疫組織化学（IHC-P）および免疫蛍光（IF/ICC）では、抗原賦活化と透過化条件を最適化してください。IHC-Pでは内因性ペルオキシダーゼの消去が推奨されます。染色はアイソタイプコントロールと比較して検証してください。
• クロマチン免疫沈降（ChIP）では、ヒストン修飾に最適化された架橋条件を確保してください。適切な陽性および陰性対照遺伝子座（例：活性化転写遺伝子 vs. 抑制遺伝子座）を使用してください。濃縮効率はqPCRによって確認できます。
• 広範な交差反応性（ヒト、マウス、ラット、その他）が予測されるため、大規模な実験に進む前に、対象とする種での反応性を確認してください。配列アライメントでは、脊椎動物全体でK18周辺領域の高い保存性が示されています。
• ELISAおよびドットブロット（DB）アプリケーションでは、この抗体を使用してアセチル化H3K18ペプチドまたは組換えヒストンを検出できます。信号増幅には、ビオチン化二次抗体とストレプトアビジン-HRPの使用を検討してください。

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