アセチル化ヒストンH3-K27 ウサギモノクローナル抗体（ChIP、WB、IHC用：SWISS: Q16695 / P68431）

主な製品仕様・パラメータ

生物学的背景：ヒストンH3（K27アセチル化）の機能と局在

• ヒストンH3はヌクレオソームのコア成分であり、DNAを巻き付けてクロマチンへと凝縮させることで、DNAを鋳型とする細胞内機構に対するDNAのアクセシビリティを制限しています。ヒストンは転写調節、DNA修復、DNA複製、染色体の安定性に中心的な役割を持っています。DNAのアクセシビリティは「ヒストンコード」と総称される複雑な翻訳後修飾（PTM）のセットとヌクレオソームリモデリングによって動的に制御されています。関連参考文献： UniProt Q16695、UniProt P68431
• ヒストンH3は主に核に局在し、染色体の重要な構造成分です。ユークロマチンとヘテロクロマチンの両方に存在し、翻訳後修飾のパターンによってこれらの状態が区別されます。関連参考文献： UniProt Q16695、UniProt P68431
• SWISSアクセッション番号に登録されている主なアイソフォームは2種類あり、Q16695が精巣特異的ヒストンH3.1t、P68431が複製依存的ヒストンH3.1で広く発現しています。精巣特異的変異体は精巣細胞でのみ発現します。関連参考文献： UniProt Q16695
• ヒストンH3にはアセチル化、メチル化、リン酸化、ユビキチン化、ADPリボシル化をはじめとする多種多様な翻訳後修飾が生じます。特定のリジン残基のアセチル化は、転写活性化に関連する重要なエピゲネティックマークです。例えば、リジン19のアセチル化（K19ac）は複数の研究によって同定されています（PMID:19608861）。UniProtナレッジベースでは現在K27のアセチル化は注釈されていませんが、この修飾は学術文献上でよく特徴づけられたマークです。アセチル化リジンのマークはヒストンアセチルトランスフェラーゼ（HAT）とヒストンデアセチラーゼ（HDAC）によって動的に制御され、クロマチン構造と遺伝子発現に影響を与えます。関連参考文献： PMID:19608861、UniProt Q16695

実験ガイダンス・技術的アドバイス

• 本抗体の免疫原はK27周辺の合成アセチル化ペプチドであるため、アセチル化状態に対する特異性を示しています。非アセチル化ペプチドによる競合実験、または酵素的脱アセチル化対照を用いて特異性を確認してください。
• 本抗体はウェスタンブロット（WB）、ドットブロット（DB）、パラフィン包埋組織免疫染色（IHC-P）、免疫蛍光／免疫細胞化学（IF/ICC）、ELISA、クロマチン免疫沈降（ChIP）、ChIP-seqの幅広い用途で使用が検証されています。ChIPを実施する際は、使用するクロマチンの状態に合わせて架橋処理と抗体濃度の最適化を検討してください。
• 予測分子量は15 kDaです。低分子量タンパク質の最適な分離のために、高濃度のSDS-PAGEゲル（例：15%）またはグラジエントゲルを使用してください。
• ヒストンH3の配列保存性に基づき、ヒト、マウス、ラット、その他の種で交差反応性が予測されています（広範囲で予測）。記載されていない種で使用する場合は、対象の種での検証を実施してください。
• ヒストン抽出プロトコル（酸抽出または高塩抽出）を用いることで、核タンパク質が濃縮され、WBでのシグナルが改善する可能性があります。
• 定量用途では、K27アセチル化あり・なしの組換えヒストンH3を標準品として使用することを検討してください。

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