アセチル化ヒストンH3-K27 ウサギ モノクローナル抗体 (Q16695/P68431) for WB, ChIP, IF, IHC

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ヒストンH3 (H3.1/H3.1t) の機能と局在

• ヒストンH3は、クロマチンの基本反復単位であるヌクレオソームのコア構成要素です。ヌクレオソームはDNAを巻き付け凝縮し、転写、DNA複製、修復、組換えのための遺伝子材料へのアクセスを調節します。この構造は染色体の安定性と適切な細胞機能に不可欠です。関連文献： UniProt Q16695, UniProt P68431.

• ヒトでは、複数の非対立遺伝子ヒストンH3バリアントが存在し、標準的な複製依存性H3.1タンパク質（H3C1、H3C2などの遺伝子にコード、GeneID: 8350, 8290）および精巣特異的H3.1tバリアント（H3-4にコード、H3FT、HIST3H3とも呼ばれる）が含まれます。標準的なH3.1は広く発現していますが、H3.1tの発現は精巣細胞に限定されています。関連文献： UniProt Q16695 (組織特異性).

• H3.1とH3.1tはともに核に局在し、染色体と結合します。これらはヌクレオソームへの組み込みを仲介するヒストンフォールドドメインと、ヌクレオソームから突出し、多数の翻訳後修飾（PTM）のプラットフォームとして機能するN末端テールを含んでいます。関連文献： UniProt P68431.

• ヒストンH3のN末端テールは、アセチル化、メチル化、リン酸化、シトルリン化などを含む広範なPTMを受け、「ヒストンコード」として知られています。これらの修飾はクロマチン動態と遺伝子発現パターンを調整します。27番目のリジン（K27）などのリジン残基のアセチル化は、エンハンサーやプロモーターを含む活性クロマチン領域の特徴であり、開いたクロマチン構造を促進し、遺伝子活性化を助長します。関連文献： UniProt P68431 (PTM概要).

• ここで説明する抗体は、ヒトヒストンH3（アイソフォームH3.1、NP_003520.1）のアセチル化リジン27に対応する合成ペプチドを用いて作製されました。アセチル化型を特異的に認識し、様々なアプリケーションでこの修飾を検出するのに適しています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• この抗体は合成アセチル化ペプチド免疫原を用いて生成されました。線状（変性）および天然のコンフォメーションの両方でエピトープを認識する可能性があることを考慮し、ウェスタンブロット（WB）、免疫沈降、クロマチンベースのアッセイなどのアプリケーションに適しています。
• WBでは、ヒストンH3の予測分子量は約15 kDaです。ただし、ヒストンはゲル条件によって異常な移動を示す場合があります。適切な陽性コントロール（例：HeLa全細胞溶解物）および分子量マーカーを含めてください。
• クロマチン免疫沈降（ChIP）およびCUT&Tagアプリケーションでは、ペプチド競合アッセイを実施し、既知の標的遺伝子座（例：H3K27acでマークされた活性エンハンサー）を陽性コントロールとして含めることで、抗体の特異性と効率を確認してください。
• 広範な予測交差反応性（ヒト、マウス、ラットなど）のため、この抗体は様々な種に適している可能性がありますが、特定のサンプルシステムでの検証を推奨します。
• 免疫蛍光（IF/ICC）および免疫組織化学（IHC-P）では、エピトープへのアクセス性は固定および透過化プロトコルに影響される可能性があります。これらのステップの最適化を推奨します。
• ELISAおよびドットブロット（DB）における抗体の性能は、特異性を評価するために、アセチル化ペプチドと非アセチル化ペプチドを使用して評価できます。

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