アセチル化HMGB1 (Lys29) ウサギポリクローナル抗体 (P09429) for WB, IF/ICC, ELISA

製品の中核仕様とパラメータ

生物学的背景：High Mobility Group Protein B1 (HMGB1)の機能と局在

• HMGB1は、高度に豊富で遍在的に発現する非ヒストン染色体タンパク質であり、DNAシャペロンとして機能し、転写、複製、DNA修復、ゲノム安定性を調節する。また、損傷や炎症時に細胞外損傷関連分子パターン（DAMP）としても作用する。 関連参考文献: PMID:33147444, PMID:27362237

• HMGB1の細胞内局在は動的に調節される。基礎状態では主に核内に存在するが、核と細胞質の間を絶えずシャトルする。特定の刺激やストレスを受けると、翻訳後修飾（核内局在シグナル（NLS1: aa 28-44, NLS2: aa 179-185）内の重要なリジン残基のアセチル化を含む）を受け、細胞質への蓄積と非従来型のリソソーム媒介経路による能動的分泌を促進する。 関連参考文献: PMID:12231511, PMID:17114460

• Lys29 (K29)でのアセチル化は、HMGB1の輸送を調節するいくつかの重要な修飾の一つである。K29を含むNLS1領域の過剰アセチル化は核への移入を妨げ、HMGB1の細胞質への再配置と最終的な細胞外空間への放出を容易にし、そこでサイトカイン様活性を発揮する。 関連参考文献: UniProt P09429

• 細胞外環境では、HMGB1の酸化還元状態がその機能を決定する：完全に還元されたHMGB1はケモカインとして、ジスルフィドHMGB1はサイトカインとして作用し、酸化されたHMGB1は免疫学的寛容を促進する。細胞外HMGB1は、RAGE、TLR2、TLR4などの受容体に結合して自然免疫応答を活性化し、敗血症、自己免疫疾患、癌における重要なメディエーターとなる。 関連参考文献: PMID:23446148, PMID:23519706

• HMGB1はまた、微生物病原性においても役割を果たし、SARS-CoV-2や他のウイルスの侵入を促進し、オートファジーとインフラマソームの活性化を調節する。 関連参考文献: PMID:35239449, PMID:22696656

実験ガイダンスと技術的ヒント

• アセチル化の可逆的な性質のため、サンプル調製中にアセチル化HMGB1を保持するために、リシスバッファーに脱アセチル化酵素阻害剤（例：トリコスタチンA、ニコチンアミド）を含めてください。
• ウェスタンブロッティングでは、HMGB1の予想分子量は約25 kDaですが、翻訳後修飾によりわずかなシフトが生じる可能性があります。対数増殖期初期の細胞または刺激した細胞を陽性対照として使用してください。
• 免疫蛍光/ICCでは、アセチル化（例：LPS処理）の誘導後、アセチル化HMGB1-K29シグナルは、静止細胞の核染色と比較して、主に細胞質または細胞外に存在する可能性があります。
• ELISAアプリケーションでは、この抗体を捕捉または検出試薬として使用し、汎用HMGB1抗体と組み合わせて、生物学的液体中のアセチル化HMGB1を特異的に定量することを検討してください。
• マウスおよびラットHMGB1との交差反応性が示されていますが、関連するサンプルシステムでの検証を推奨します。

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