アセチル化p53-K382 ウサギポリクローナル抗体（P04637）、ドットブロット・ELISA用途

製品主要仕様・パラメータ

生物学的背景：細胞性腫瘍抗原p53 (TP53) の機能と局在

細胞性腫瘍抗原p53（TP53）は多機能転写因子であり、細胞ストレスに応答して細胞周期停止、DNA修復、アポトーシスを誘導することで腫瘍抑制に中心的な役割を果たします。ゲノムの守護者として働き、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤を含む主要標的遺伝子の発現を制御することで細胞分裂を負に調節します。p53を介したアポトーシスにはBAXおよびFAS抗原の発現刺激またはBcl-2の抑制が関与し、そのアポトーシス促進活性はASPPファミリータンパク質との相互作用によって調節されます。さらにp53は、PER2のCLOCK-BMAL1を介した転写を抑制することで概時計を制御しています。 関連文献: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724, PMID:15340061, PMID:24051492

p53は活性化状態やアイソフォームに応じて複数の細胞内区画に局在します。主に核に存在しますが、細胞質、PML核小体、ミトコンドリア、小胞体、中心体にも認められます。酸化ストレスやマイトマイシンC処理によってミトコンドリアへと移行し、ここでp53はPPIFと協働してネクローシスを活性化します。 関連文献: PMID:15340061, PMID:17170702, PMID:11025664, PMID:12810724, PMID:22726440, PMID:27323408, PMID:28842590

p53は遍在的に発現していますが、そのアイソフォームは組織によって発現パターンが異なります。アイソフォーム2は脳、肺、前立腺に存在せず、アイソフォーム8は結腸、骨髄、精巣、胎児脳、腸に限局しています。 関連文献: PMID:16131611

p53は翻訳後修飾を多数受け、その安定性と活性が制御されています。リジン382（K382）のアセチル化はp300/CBPなどのアセチルトランスフェラーゼによって媒介され、p53のDNA結合能と転写活性を増強します。この修飾は脱アセチル化酵素によって逆に働くことがあり、K382はメチル化やジメチル化を受けることもあるため、複雑な制御ネットワークが存在することがわかっています。 関連文献: PMID:10656795, PMID:15448695, PMID:20228809, PMID:23431171, PMID:29681526, PMID:19608861, PMID:17707234, PMID:20870725, PMID:22864287

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 免疫原はヒトp53のK382周辺の残基に対応する合成アセチル化ペプチドです。本抗体はアセチル化型を特異的に認識すると予想されますが、非修飾ペプチドまたはこの部位に生じる他の修飾に対する交差反応性については、実験系で確認してください。
• ドットブロットアッセイでは、変性させたタンパク質サンプルまたはペプチドをメンブレンにスポットする方法を推奨します。ELISAでは、免疫原ペプチドまたは全長p53タンパク質でコーティングする方法が適している可能性があります。
• ポリクローナル抗体はロット間でばらつきが生じることがあるため、適切な対照（例：非アセチル化ペプチドによる競合実験、トリコスタチンAなどの脱アセチル化酵素阻害剤で処理した細胞のライセートなど）を用いて、使用する実験系で抗体の特異性を検証してください。
• サンプル調製前に細胞をドキソルビシンやエトポシドなどのDNA損傷剤で処理することで、p53のアセチル化を誘導できます。
• 本抗体は保冷剤とともに発送されます。到着後は分注して-20℃以下で長期保存してください。凍結融解の繰り返しは避けてください。

CamelBioについて：ワンストップ調達の架け橋

CamelBioはIVD原料の総合的なワンストップ調達パートナーとして、診断薬メーカー、研究機関、ラボに対し、抗体、抗原、補助試薬の膨大なポートフォリオへの円滑なアクセスを提供しています。本アセチル-p53-K382 ウサギpAbは腫瘍抑制因子p53の重要な翻訳後修飾を標的としており、腫瘍学、アポトーシス、細胞周期研究の貴重なツールとなります。本製品に加え、CamelBioは検証済み抗体ペア、最適化されたモノクローナル抗体・ポリクローナル抗体、大量補助試薬、希少標的原料の調達まで、構想段階から臨床開発まで、アッセイ開発パイプライン全体を支援することが可能です。