WB、ELISA用抗14-3-3シータポリクローナル抗体 - P27348

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：14-3-3シータの機能と局在

• 14-3-3タンパク質シータは、14-3-3 T細胞タンパク質、14-3-3タウタンパク質、またはHS1タンパク質とも呼ばれ、YWHAQ遺伝子にコードされています。
• 多数のシグナル伝達経路においてアダプタータンパク質として機能し、通常はパートナータンパク質上のホスホセリンまたはホスホスレオニンを含むモチーフに結合することで、その活性を調節します。
• 特に、14-3-3シータはPDPK1のキナーゼ活性を負に調節し、下流のシグナル伝達ネットワークに影響を与えます。
• このタンパク質は主に細胞質に局在し、細胞内シグナル伝達における役割と一致しています。
• 脳、心臓、膵臓で豊富に発現し、腎臓および胎盤では発現レベルが低くなっています。特筆すべきことに、孤発性ALS患者の腰髄で発現が上昇しており、特に下位運動ニューロン優位の病変を有する患者で顕著です。
• 翻訳後修飾には、アセチル化、ニトロ化、リン酸化、ユビキチン様結合、ならびにイソペプチド結合の形成が含まれ、これらが相互作用や安定性を調節している可能性があります。
• 三次元構造が明らかにされており、リン酸化ペプチド結合溝および二量体構造に関する知見が得られます。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原（ヒト14-3-3シータのアミノ酸49～149を含む合成ペプチド）は特定の領域を標的とするため、変性ウエスタンブロット（WB）条件下で直鎖状エピトープを検出するのに適している可能性があります。
• ELISAでは、アッセイの特異性を検証するため、免疫原ペプチドを陽性対照または固相化抗原として使用することを検討してください。
• マウスおよびラットとの交差反応性が報告されているため、この抗体は比較研究に使用できます。定量解析の前に、使用する組織または細胞株での反応性を確認してください。
• 予測分子量は約28 kDaです。適切な分子量マーカーを用いてバンドサイズを確認し、翻訳後修飾によってわずかなシフトが生じる可能性も考慮してください。
• 14-3-3シータは細胞質タンパク質であるため、細胞内分画または免疫沈降によって標的を濃縮し、複雑なサンプルにおける検出感度を向上できる可能性があります。
• ポリクローナル抗体ではロット間差が生じる場合があります。非特異的結合を最小限に抑えるため、適切なブロッキングおよび洗浄条件の最適化を行ってください。

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