ウエスタンブロット、ELISA用 抗ABCA1 ウサギモノクローナル抗体 - O95477

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ABCA1の機能と局在

• ABCA1（ATP-binding cassette sub-family A member 1）は、ABC-1、CERP、コレステロール流出調節タンパク質とも呼ばれ、ATP結合カセット（ABC）トランスポータースーパーファミリーの一員です。
• これはリン脂質輸送ATPaseとして機能し、ATP加水分解と共役して、ホスファチジルコリンおよびホスファチジルセリンを細胞質側から膜の細胞外側小葉へと輸送します。この活性は、アポリポタンパク質へのリン脂質の転送、すなわち新生高比重リポタンパク質（HDL）の形成開始に不可欠です。 関連参考文献： PMID:24097981, PMID:35974019
• ABCA1はまた、細胞内コレステロールのアポリポタンパク質への流出を仲介し、これは逆コレステロール輸送とHDL成熟における重要なステップです。 関連参考文献： PMID:10533863, PMID:14754908, PMID:24097981
• 主に細胞膜およびエンドソームに局在し、ABCA1は広く発現していますが、マクロファージで最も豊富であり、マクロファージのコレステロール恒常性におけるその主要な役割を反映しています。
• 翻訳後修飾には、リン酸化（リン酸化タンパク質）とパルミトイル化（脂質修飾）が含まれ、また、タンパク質はジスルフィド結合とグリコシル化部位を含み、これらはその安定性と活性を調節する可能性があります。
• 脂質代謝における機能から、ABCA1は動脈硬化および関連する心血管疾患に関与しており、ABCA1の変異はタンジール病および家族性HDL欠乏症と関連しています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトABCA1のC末端領域内のアミノ酸1170-1350に対応します。この領域は細胞内に存在すると予測されており、これに対して作製された抗体は、変性条件下のウエスタンブロットでフルレングスのABCA1を検出する可能性があります。マクロファージや肝細胞など、既知のABCA1発現を有する細胞株を用いて特異性を検証することを検討してください。
• ウエスタンブロッティングでは、ABCA1の大きな予測分子量（約254 kDa）に注意してください。高分子量タンパク質の効率的な転移を確保するために、低濃度のポリアクリルアミドゲル（例：6%ゲル）と延長した転移時間を使用してください。適切な分子量マーカーを含めてください。
• この抗体は、マウスおよびラットのABCA1と交差反応することが報告されています。これらの種で使用する場合は、ABCA1を発現することが知られているマクロファージ由来細胞や組織などの陽性対照をテストすることで反応性を確認してください。
• ELISAアプリケーションでは、抗体濃度を捕捉または検出試薬として最適化してください。ELISAにおける抗体の反応性により、生物学的サンプル中のABCA1の定量測定が可能になる場合がありますが、サンドイッチ法では適切な検出抗体との組み合わせが必要になる場合があります。

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