抗アグレカン ウサギポリクローナル抗体（WB、IHC、IF、ELISA対応） - P16112

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：アグレカンの機能と局在

• アグレカンコアタンパク質（AGC1、CSPG1、ACAN）は大型のコンドロイチン硫酸プロテオグリカンで、軟骨細胞外マトリックスの主要な構造成分です。
• 関節軟骨における圧縮力に対する耐性を媒介し、組織の水分保持能と耐荷重性を維持します。
• アグレカンはN末端球状ドメインを介してヒアルロン酸と活発に結合し、軟骨の完全性に不可欠な巨大な超分子凝集体を形成します。
• アグレカンは主に軟骨で発現します（PubMed:7524681）。タンパク質レベルでは線維芽細胞にも検出されています（PubMed:36213313）。 関連参考文献: PMID:7524681 PMID:36213313
• このタンパク質は分泌され、主に軟骨組織の細胞外マトリックスに局在します。
• アグレカンはアグレカン/バーシカンプロテオグリカンファミリーに属し、免疫グロブリン様ドメイン、リンクドメイン、C型レクチンドメインを含みます。
• 選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成され、コアタンパク質はコンドロイチン硫酸とケラタン硫酸の側鎖によって高度にグリコシル化されています。
• 翻訳後修飾にはジスルフィド結合、カルシウム結合、O結合型グリコシル化が含まれます。成熟タンパク質はEGF様ドメインとスシ反復モチーフを持ちます。
• ヒトACANの変異は骨格異形成や小人症の表現型と関連しており、軟骨の発生と機能における必須の役割が裏付けられています。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体の免疫原はヒトアグレカンのアミノ酸420～575番に対応し、G1ドメインとG2ドメインの間に位置する領域です。この球間ドメインは組織溶解液中でタンパク質分解を受けやすい場合があるためご注意ください。
• ウエスタンブロッティングでは、アグレカンは分子量が大きく（約261 kDa）、グリコシル化が高度であるため、勾配SDS-PAGE（例：4～20%）と長時間の転写が必要になる場合があります。バンドの分離能を向上させるために脱グリコシル化処理をご検討ください。
• （パラフィン包埋）免疫組織化学では、コンドロイチナーゼABCまたはヒアルロニダーゼによる抗原賦活化により、かさばるGAG側鎖が除去され、エピトープを露出させることができます。
• ELISAでは、組換えアグレカンまたはコンドロイチナーゼ処理した軟骨抽出物でコーティングすることで感度が向上する可能性があります。ポリクローナル抗体であるため、サンドイッチアッセイで安定したシグナルが得られる場合があります。

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