WB、IP、ELISA用 Anti-AK4 ウサギポリクローナル抗体 - P27144

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：AK4の機能と局在

• AK4（アデニル酸キナーゼ3様またはGTP:AMPホスホトランスフェラーゼとしても知られる）は、AK4遺伝子（GeneID: 205）によってコードされるミトコンドリア酵素であり、アデニル酸キナーゼファミリーに属します。
• 広い基質特異性を持つミトコンドリアヌクレオシドリン酸キナーゼとして機能し、ヌクレオシドリン酸の相互変換を触媒することで細胞内ヌクレオチドの恒常性を維持します。関連文献: PMID:19073142 PMID:19766732 PMID:23416111
• AK4は、ATPをリン酸供与体としてAMPをADPに優先的にリン酸化します。また、AMPのリン酸化にGTPを代替リン酸供与体として使用することもできます。関連文献: PMID:19766732
• in vitroでは、AK4はより広い基質特異性を示し、CMP、dAMP、dCMPをリン酸化し、GTPを代替供与体として使用します。関連文献: PMID:19766732 PMID:23416111
• この酵素はジリン酸キナーゼ活性も持ち、対応するジリン酸からATP、CTP、GTP、UTP、TTP、dATP、dCTP、dGTPを生成します。関連文献: PMID:23416111
• AK4は、エネルギーセンサーAMPKのリン酸化と活性化を調節することで、細胞内ATPレベルの調節に重要な役割を果たします。関連文献: PMID:24767988 PMID:26980435
• 酸化ストレスに対する細胞応答において保護機能を持ち、ミトコンドリアのレジリエンスに寄与します。関連文献: PMID:19130895 PMID:23474458 PMID:26980435
• 細胞内局在としては、AK4はミトコンドリアマトリックスに局在しており、これはミトコンドリアヌクレオチド代謝におけるその役割と一致しています。
• 組織発現は腎臓で最も高く、心臓と肝臓で中程度、脳では低く、これは高エネルギー需要組織におけるその重要性を反映しています。

実験ガイドと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトAK4のN末端223アミノ酸に対応し、保存されたアデニル酸キナーゼドメインをカバーしています。この領域はヒトとマウス間で高度に相同性が高く、観察された交差反応性を支持します。
• ウェスタンブロット（WB）解析では、陽性コントロールとして腎臓または肝臓の組織ライセートを使用してください。開始希釈倍率は1:500-1:2000を考慮し、適切な分子量マーカー（〜25 kDa）で検証してください。
• 免疫沈降（IP）では、標的の存在量を増やすためにミトコンドリア濃縮画分を使用すると効果的です。抗体量とインキュベーション条件は経験的に最適化してください。
• ELISAアプリケーションでは、標準として組換えAK4タンパク質をコーティングし、抗体を滴定してください。検出抗体とのペアリングには注意深い検証が必要です。
• AK4はミトコンドリアマトリックスタンパク質であるため、信号特異性を高めるために、細胞内分画法やオルガネラ特異的染色を考慮してください。

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