WB、IF/ICC、ELISA用 抗AKAP8 ウサギポリクローナル抗体 - O43823

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：AKAP8の機能と局在

• AKAP8（別名AKAP95）はAキナーゼアンカータンパク質であり、cAMP依存性プロテインキナーゼ（PKA type II）を特定の細胞内区画に隔離し、精密なシグナル伝達を促進する（PubMed:9473338）。 関連文献: PMID:9473338
• 有糸分裂染色体上のPKAの足場として機能し、コンデンシン複合体サブユニットNCAPD2をリクルートして、PKAのアンカーリングとは独立に有糸分裂中の染色体凝縮を維持する（PubMed:10601332, PubMed:10791967, PubMed:11964380）。 関連文献: PMID:10601332, PMID:10791967, PMID:11964380
• AKAP8は、サイクリンD/EのCDK4への運搬を促進し、HDAC3のリクルートを介したG2/M期移行および有糸分裂ヒストン脱アセチル化に必要とされることで、細胞周期調節に関与する（PubMed:14641107, PubMed:16980585）。 関連文献: PMID:14641107, PMID:16980585
• Toll様受容体シグナル伝達を調節し、PKAをNFKB1に標的化させることで、初期のLPS誘導性マクロファージ活性化におけるTNF産生を抑制する（相同性による）。
• このタンパク質は核、核小体、核マトリックス、細胞質など複数の細胞内区画に局在し、クロマチンリモデリング、転写調節、シグナル伝達などの文脈依存的な機能を可能にする。
• AKAP8はGCリッチDNAを優先的に結合し、リボソームRNA（rRNA）クロマチンと関連することから、rDNA転写調節における役割が示唆される（PubMed:26683827）。 関連文献: PMID:26683827
• 心臓、肝臓、骨格筋、腎臓、膵臓、成熟樹状細胞で高発現しており、その広範な生理学的関連性を反映している。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトAKAP8のアミノ酸480–692に対応し、C末端のジンクフィンガードメインを含む領域である。本抗体は、この機能的に関連するDNA結合領域内のエピトープを認識する可能性があることを考慮すること。
• ウェスタンブロット（WB）では、約76 kDaの特異的バンドが期待される。ヒトまたはマウス細胞（例：HeLa、HEK293、NIH/3T3）の核濃縮リサートを陽性対照として使用し、分子量マーカーで検証すること。
• 免疫蛍光（IF/ICC）では、核小体および細胞質局在の可能性がある斑点状の核染色が予想される。確認のため、核マーカー（例：DAPI、ラミン）との共染色が推奨される。
• ELISAでは、標準的な直接法またはサンドイッチ法のプロトコルが適用可能である。組換えAKAP8タンパク質またはペプチドを使用して、コーティング抗原濃度と抗体希釈率を最適化すること。
• マウスとの交差反応性があるため、本抗体は種間研究に適している。信頼性の高いデータを得るために、ノックダウンまたはノックアウト対照による特異性の確認を常に行うこと。

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