WB、IF/ICC、IHC-P、ELISA用Anti-AKT1ポリクローナル抗体 - P31749

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：AKT1の機能と局在

• AKT1はセリン/スレオニンプロテインキナーゼであり、プロテインキナーゼB（PKB）としても知られ、AKTキナーゼファミリー（AKT1、AKT2、AKT3）に属しています。代謝、増殖、細胞生存、成長、および血管新生を含む多様なプロセスを制御します。 関連参考文献： PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• AKT1は、インスリン、IGF-1、EGFなどの成長因子のPI3K下流の効果を仲介し、GLUT4の膜移動によるグルコース取り込みと、GSK3の阻害によるグリコーゲン合成を制御します。 関連参考文献： PMID:11994271
• BADやMAP3K5などのアポトーシス促進因子をリン酸化して阻害したり、NF-κBやCREB1などの生存経路を活性化したりすることにより、細胞生存を促進します。 関連参考文献： PMID:11154276 PMID:9829964
• AKT1は細胞質、核、細胞膜、ミトコンドリア膜間腔に局在しており、複数のシグナル伝達区画に関与していることを反映しています。
• AKT1はリン酸化やアセチル化などの重要な翻訳後修飾を受け、原癌遺伝子と見なされています。その発現はがんにおいてしばしば上方制御されており、乳がんの進行に伴いTyr-176リン酸化型が増加します。
• AKT1はヒト細胞に普遍的に発現しており、細胞の成長と分化において重要な役割を果たしています。組織特異的な上方制御は、前立腺がんおよび乳がんで観察されています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はヒトAKT1のC末端領域（aa 350–480）内のペプチドに対応しており、アイソフォーム特異性を付与する可能性があります。ただし、AKT2またはAKT3との交差反応性が懸念される場合は、組換えタンパク質またはsiRNAを使用して検証してください。
• ウェスタンブロットでは、変性および還元条件下で通常約56 kDaのバンドが検出されます。適切なポジティブコントロール（HeLa、MCF-7ライセートなど）を使用し、観察される移動度はリン酸化状態を反映している可能性があることに注意してください。
• IF/ICCおよびIHC-Pプロトコルでは、それぞれ透過処理と抗原賦活化が必要になる場合があります。サンプルタイプに合わせて固定化方法（4% PFAとメタノールの比較など）を最適化し、バックグラウンドを最小限に抑えるためにブロッキング工程を含めてください。
• ELISAアプリケーションは、間接法またはサンドイッチ法でセットアップできます。適切な捕捉抗体と組み合わせることで感度が向上する場合があります。抗体を滴定し、一貫性のあるコーティングバッファーを使用してください。
• マウスおよびラットのAKT1との交差反応性は報告されていますが、非ヒトサンプルを使用する場合は、免疫原領域における種特異的な配列の相同性を確認してください。

CamelBio：ワンストップ調達パートナー

CamelBioは、細胞シグナル伝達およびがん研究向けの検証済み抗体を含む、IVD原材料の包括的なポートフォリオにより、体外診断薬開発者および研究者を支援しています。このAKT1ポリクローナル抗体は、抗体ペア、組換えタンパク質、およびバルク補助試薬にわたる当社の製品の一例です。希少なターゲットやカスタムターゲットについては、当社の調達ネットワークがカスタマイズされたソリューションを提供します。コンセプトから臨床へ、アッセイ開発を加速させる方法についてご相談ください。