WB、ELISA用 抗ALKBH5 ウサギモノクローナル抗体 - Q6P6C2

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ALKBH5の機能と局在

• ALKBH5は、分子状酸素、α-ケトグルタル酸、鉄に依存する反応により、RNA中のm6Aの酸化的脱メチル化を触媒し、mRNA上のm6A修飾を逆転させる。
  関連文献: PMID:21264265 PMID:23177736 PMID:24489119
• その脱メチル化酵素活性を通じて、ALKBH5はmRNAのプロセシング、翻訳、輸送を調節し、エピトランスクリプトームの重要な調節因子として機能する。
  関連文献: PMID:23177736 PMID:34048572 PMID:36944332
• ALKBH5はまた、in vitroで一本鎖DNA中のN(6)-メチルアデノシンを脱メチル化することが可能であり、より広い基質特異性を示唆している。
  関連文献: PMID:24616105
• 精子形成において必須の役割を果たし、減数分裂後期および半数体期に必要とされる。精子細胞および円形精子細胞におけるALKBH5によるm6A脱メチル化は、雄性生殖細胞における正しいスプライシングとより長い3'-UTRを持つmRNAの産生を保証する。
• ALKBH5は、核内の膜なしオルガネラであるパラスペックルの形成に、液体-液体相分離を介して関与しており、非コードRNA NEAT1に対するその脱メチル化酵素活性がこのプロセスに不可欠である。
  関連文献: PMID:37369679 PMID:37474102
• T細胞発達の負の調節因子として、ALKBH5はJAG1およびNOTCH2転写産物を脱メチル化することでγδT細胞の増殖を抑制し、CCL28 mRNAの不安定化を介して制御性T細胞の動員を抑制する。
• 細胞内局在として、ALKBH5は核スペックルおよび核質に局在し、RNAプロセシングおよび核内ダイナミクスにおけるその機能と一致する。
• アセチル化、リン酸化、ユビキチン化は、ALKBH5に注釈された翻訳後修飾の一部であり、その安定性と活性を調節する可能性がある。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原（ヒトALKBH5のアミノ酸66-394）はタンパク質の大部分をカバーしている。重要なアプリケーションでは、ノックアウトまたはノックダウンモデルを用いて特異性を確認することを検討すること。
• ウェスタンブロッティングでは、約44 kDaのバンドが期待される。陽性コントロールとして、ALKBH5発現が高い組織（例：肺、精巣）からのライセートを使用すること。
• ELISAでは、直線的な検出を達成しバックグラウンドを最小限に抑えるために、コーティング抗原濃度および抗体希釈率を最適化すること。
• この酵素は核に局在するため、検出用ライセート調製時には、細胞溶解および抽出プロトコルが適切であることを確認すること。

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