ウエスタンブロット、ELISA用 抗AMBPウサギポリクローナル抗体 - P02760

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：AMBPの機能と局在

• AMBP遺伝子は、抗酸化作用および組織修復活性を持つα-1-ミクログロブリン（protein HC/A1M）と、クニッツ型セリンプロテアーゼ阻害剤であるビクニンの2つの機能鎖に切断される前駆体タンパク質をコードしています。
• α-1-ミクログロブリン（A1M）は、還元酵素、ヘム結合、ラジカル消去活性を示します。細胞外メトヘモグロビンを還元し、遊離ヘムを結合・分解して溶血を防ぎ、低密度リポタンパク質粒子や細胞外マトリックス構造に対する酸化的損傷から保護します。 関連参考文献: PMID:11877257 PMID:15683711 PMID:22096585 PMID:32092412 PMID:25698971
• ミトコンドリア内では、A1Mは呼吸鎖の複合体Iに関連し、フリーラジカルを消去し、シトクロムcをFe3+からFe2+に還元することで、レドックス恒常性を維持します。 関連参考文献: PMID:23157686 PMID:32823731
• ビクニンはクニッツ型セリンプロテアーゼ阻害剤として機能し、カリクレイン、グランザイムK、プラスミン、第X因子、トリプシン、キマーゼ、トリプターゼを効果的に阻害します。気道炎症および細胞傷害性応答の調節に役割を果たします。 関連参考文献: PMID:10480954 PMID:15917224 PMID:16873769
• ビクニンはまた、細胞外マトリックスの構造成分でもあり、細胞外空間のリモデリングと細胞接着に寄与します。インターアルファトリプシン阻害剤複合体の一部を形成してハイアルロン酸への重鎖の転移を促進し、シュウ酸カルシウム結晶化を阻害します。 関連参考文献: PMID:20463016 PMID:25301953 PMID:16873769 PMID:7676539
• AMBPは肝臓で広く発現し、血漿、尿、脳脊髄液に分泌されます。また、赤血球、胎盤組織、ケラチノサイト、真皮、気道上皮でも検出されます。細胞内局在としては、細胞外空間、小胞体、細胞質、細胞膜、核膜、ミトコンドリア内膜に存在します。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 使用した免疫原は、ヒトAMBPのアミノ酸20-202にまたがり、α-1-ミクログロブリン（A1M）鎖をカバーしています。この抗体はA1Mを認識すると予想され、全長前駆体も検出する可能性があります。ウエスタンブロットでのバンド解釈時にこれを考慮してください。
• WBでは、全長AMBPの予測分子量は約39 kDaですが、処理された鎖やグリコシル化された形態は異なるサイズで現れる可能性があります。適切な分子量マーカーを使用し、還元条件と非還元条件を考慮してください。
• ELISAアプリケーションでは、このポリクローナル抗体を検出試薬として使用できます。サンドイッチELISAフォーマットを希望する場合は、異なるエピトープに特異的なモノクローナル捕捉抗体との組み合わせにより、アッセイの特異性が向上する可能性があります。
• この抗体はマウスAMBPと交差反応するため、エピトープ保存の可能性を示唆しています。マウス実験系で使用する前に、マウス由来サンプルでの検証をお勧めします。
• ビクニン鎖にジスルフィド結合が存在するため、ビクニン鎖を標的とする場合は、エピトープ認識を保持するために非還元条件が必要となる場合があります。

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