WB、IF/ICC、IHC-P、ELISA用 抗AMPK alpha 1/2 モノクローナル抗体 - Q13131 / P54646

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景: AMPK alpha 1/2の機能と局在

• AMPK触媒サブユニットα-1 (PRKAA1) は中心的なエネルギーセンサーとして機能し、細胞のエネルギーストレス時にATPレベルを回復させるため、異化経路を活性化し、同化過程を抑制します。 関連文献: PMID:17307971 PMID:17712357 PMID:24563466
• 脂質代謝において、AMPKはアセチル-CoAカルボキシラーゼ (ACACA/ACACB) およびHMG-CoA還元酵素 (HMGCR) を直接リン酸化して不活性化し、脂肪酸およびコレステロール合成を抑制します。
• AMPKは、主要な転写因子および補助活性化因子 (例：CRTC2、FOXO3、SREBF1、PPARGC1A) およびヒストンH2Bをリン酸化することにより、転写リプログラミングを制御し、代謝遺伝子発現を調節します。 関連文献: PMID:11518699 PMID:11554766 PMID:15866171
• RPTORおよびTSC2のリン酸化を介して、AMPKはmTORC1複合体を阻害し、細胞成長と増殖のダウンレギュレーションをもたらし、栄養飢餓条件下ではオートファジーを促進します。 関連文献: PMID:14651849 PMID:18439900 PMID:20160076 PMID:21205641
• 細胞内局在に関して、AMPK α-1は主に細胞質と核に局在し、後期エンドソーム上でも検出され、その多様なシグナル伝達役割と一致しています。
• このタンパク質は、複数のセリン/スレオニン残基で広範なリン酸化を受け、プロテオミクス同定に基づくと、N結合型グリコシル化を有している可能性があります。
• AMPK α-1はまた、タウタンパク質キナーゼ活性を示し、アミロイドβに応答してMAPT/TAUをリン酸化することができますが、そのin vivoでの重要性は不明です。
• この抗体は、α-1触媒サブユニット (PRKAA1遺伝子にコード、UniProt Q13131) と高度に相同性の高いα-2サブユニット (PRKAA2遺伝子にコード、UniProt P54646) の両方を認識するため、汎用AMPK-αツールとなります。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトAMPK α-1の13–300残基にまたがり、キナーゼドメインを含みます。この領域はヒト、マウス、ラット間でよく保存されており、報告されている広範な種交差反応性を裏付けています。
• ウェスタンブロッティングでは、約64 kDaに主なバンドが期待されます。内因性AMPK α-1は広く発現しています。HeLa、HEK293Tなどの細胞株、または肝臓や骨格筋などの組織のライセートを陽性対照として使用することを検討してください。
• 免疫蛍光および免疫組織化学では、細胞質および核のシグナルの両方が予想されます。特定のストレス条件下 (例：グルコース欠乏、AMPK活性化剤) では、細胞内局在が変化する可能性があるため、固定および透過化プロトコルは標的コンパートメントに合わせて最適化する必要があります。
• ELISAベースのアッセイでは、この抗体のモノクローナル性によりロット間の一貫性が保証されます。ただし、ユーザーは特定のアッセイシステムにおいて最適なコーティングおよび検出条件を検証する必要があります。

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