エネルギー代謝研究用 Anti-AMPKα2 ウサギポリクローナル抗体 - P54646

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：AMPKα2の機能と局在

• AMP活性化プロテインキナーゼ（AMPK）の触媒サブユニットとして機能し、ATP枯渇時に細胞のエネルギー恒常性を回復するマスターエネルギーセンサーである。
  関連文献： PMID:17307971, PMID:17712357
• アセチル-CoAカルボキシラーゼ（ACACA）およびHMG-CoA還元酵素（HMGCR）を直接リン酸化して不活性化し、脂肪酸およびコレステロール合成を阻害する。
  関連文献： PMID:7959015
• TBC1D4/AS160のリン酸化を介してSLC2A4/GLUT4の細胞膜への移行を促進し、筋組織におけるグルコース取り込みを促進する。
• TSC2およびRPTORをリン酸化することでmTORC1シグナル伝達を負に制御し、エネルギー状態と細胞成長およびオートファジーを関連付ける。
  関連文献： PMID:14651849, PMID:20160076, PMID:21205641
• CRTC2、FOXO3、ヒストンH2Bなどの主要な調節因子をリン酸化して転写を調節し、クロマチン構造と遺伝子発現に影響を与える。
  関連文献： PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171
• インスリンシグナル伝達と受容体の内部化に関与し、グルコース恒常性に影響を与える。
  関連文献： PMID:25687571
• 細胞質、核、および後期エンドソームに局在し、その多様な調節役割を反映している。
• CRY1をリン酸化することで概日リズムに関与し、ストレス下でのMTFR1Lリン酸化を介したミトコンドリア断片化にも役割を果たす。
  関連文献： PMID:36367943

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトPRKAA2の触媒キナーゼドメイン内の残基270–343にまたがる。抗体特異性はノックアウトまたはノックダウンモデルで検証することを推奨。
• ウェスタンブロットでは約62 kDaのバンドが予想される。報告されている交差反応性に基づき、ヒトおよびラットの組織/細胞株からの全細胞溶解物を使用すること。
• 免疫蛍光/ICCでは、細胞を透過処理して細胞質および核内のプールの両方を検出する。信号は後期エンドソームに対応する可能性のある点状構造に局在する場合がある。
• ELISAでは、組換え免疫原を陽性対照として使用し、コーティング抗原濃度と抗体希釈率を最適化すること。
• AMPKα2はリン酸化によって調節されるため、溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を含めることを推奨。

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