WB・ELISA用抗APAF1ウサギモノクローナル抗体 - O14727

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：APAF1の機能と局在

• APAF1（アポトーシスプロテアーゼ活性化因子1）はCED4またはAPAF-1としても知られ、APAF1遺伝子（KIAA0413）によってコードされています。選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが存在します。
• このタンパク質はアポトソームの中心的な構成要素として機能し、オリゴマー化したAPAF1がチトクロムc依存的なプロカスパーゼ9の自己タンパク質分解活性化を媒介し、続いてカスパーゼ3を活性化してアポトーシスを実行します。この過程にはATP結合が必要です。
• APAF1は複数のドメインを持つタンパク質で、N末端のカスパーゼ募集ドメイン（CARD）、中央のヌクレオチド結合・オリゴマー化ドメイン（NOD）、チトクロムc結合に必須なC末端のWD40反復領域を含んでいます。
• 亜細胞レベルでは、通常条件下でAPAF1は主に細胞質に存在し、アポトーシス誘導後にアポトソーム複合体へと移行します。
• 発現は全身的に認められ、成人の脾臓、末梢血白血球、胎児の脳、腎臓、肺で最も高いレベルが検出されます。アイソフォーム1は特に心臓、腎臓、肝臓に存在します。
• このタンパク質はATP/dATP結合を受け、カルシウムを介した調節を受けると考えられており、タンパク質間相互作用に必須なWD反復配列を有しています。
• キーワード: 3D構造、選択的スプライシング、アポトーシス、ATP結合、カルシウム、細胞質、直接タンパク質配列決定、ヌクレオチド結合、プロテオミクス同定、参照プロテオーム、反復配列、WD反復配列。

実験ガイダンス・技術的Tips

• 本抗体の免疫原はヒトAPAF1のアミノ酸470～600番（中央のNOD領域）に対応しており、全長型および切断型バリアントの検出が可能ですが、対象の細胞モデルにおいて特異性の検証を行ってください。
• ウエスタンブロッティングでは、アイソフォームの多様性とカスパーゼ切断により、APAF1は複数の分子量（38～142 kDa）で泳動されることに留意してください。バンドパターンは細胞種やアポトーシス刺激によって変動する場合があります。
• ELISAへの応用では、組換えAPAF1を用いて標準曲線を作成することが可能です。アッセイの特異性を検証するため、適切な陽性対照（例：スタウロスポリン処理したJurkat細胞ライセート）と陰性対照を含めてください。
• 配列相同性からマウスAPAF1に対する交差反応性が予想されますが、マウス組織または細胞株での実験的な確認を推奨します。
• 実験系ごとに、抗体希釈率、インキュベーション条件、検出試薬の最適化を行ってください。

CamelBioについて：ワンストップ調達ブリッジ

CamelBioはIVD原料の統合的な調達パートナーです。創出から商業規模まで、検証済みの抗体、抗原ペア、補助試薬を提供しています。本抗APAF1モノクローナル抗体はアポトーシス研究および診断アッセイ開発を支援し、信頼性の高い大量供給と技術コンサルティングをご利用いただけます。希少な標的やカスタマイズされたソリューションについても、CamelBioはグローバルネットワークを活用して供給ギャップを効率的に解消します。