WB、ELISA用 抗ARF5 ウサギ ポリクローナル抗体 - P84085

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：ARF5の機能と局在

• ARF5は、細胞内小胞輸送と細胞小器官構造に重要な役割を果たす低分子量GTPaseであるADP-リボシル化因子（ARF）ファミリーの一員です。
• GTP結合タンパク質として機能し、ゴルジ装置における小胞出芽と脱被覆に寄与し、小胞体とゴルジ体間のタンパク質輸送を仲介します。
• ARF5は、mTORC1を細胞膜ラフルへ動員することを促進することでmTORC1活性を調節し、PI3K/Aktシグナル経路を介したその活性化を促進します。 関連参考文献： PMID:36735494
• リソソーム損傷に対する早期応答因子として機能し、リソソーム品質管理経路に参加し、細胞恒常性維持におけるその役割を浮き彫りにしています。 関連参考文献： PMID:41293316
• 微生物感染中、ARF5はコレラ毒素触媒サブユニット（ADP-リボシルトランスフェラーゼ）のアロステリック活性化因子として機能し、宿主-病原体相互作用への関与を示しています。
• このタンパク質は、細胞膜、ゴルジ装置、トランスゴルジネットワーク膜、細胞質（核周囲領域）、リソソーム膜など、複数の細胞区画に局在します。
• ARF5は、膜への固定を担うN-ミリストイル化などの翻訳後修飾を特徴とし、その調節機能に必須の保存されたGTP結合ドメインを含みます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトARF5のN末端領域（アミノ酸1-180）に対応します。この領域には保存されたGTP結合ドメインが含まれており、フルレングスのARF5を検出する可能性が高いです。ウエスタンブロット検証には、ARF5を発現するHeLa、HEK293、または他のヒト細胞株由来の陽性コントロールリサートの使用を検討してください。
• ウエスタンブロットでは、ARF5の予測分子量は約21 kDaです。還元条件下でのSDS-ページと標準的なブロッキングバッファーを使用してください。一次抗体の希釈率は1:500から1:2000の間で経験的に最適化し、種に適した二次抗体を含めてください。
• 本抗体はELISAアプリケーションに適しています。直接ELISAまたはサンドイッチELISAでは、免疫原として使用した組換えタンパク質または細胞溶解物に対して抗体を滴定し、最適なコーティング濃度と検出濃度を決定してください。
• 交差反応性はヒト、マウス、ラットのARF5に対して報告されています。マウスまたはラットのサンプルを扱う場合は、翻訳後修飾やタンパク質発現レベルが異なる可能性があるため、特定のモデルシステムで抗体を検証してください。

CamelBio：ワンストップ調達の架け橋

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