WB、IF/ICC、ELISA用抗ASAH1ウサギポリクローナル抗体 - Q13510

主な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ASAH1（酸セラミダーゼ）の機能と局在

• ASAH1は、酸性pH下でセラミドをスフィンゴシンと遊離脂肪酸に加水分解するリソソーム酵素をコードし、特にC12-セラミドに対して高い触媒効率を示します(PubMed:10610716, PubMed:15655246, PubMed:7744740)。 関連文献: PMID:10610716 PMID:15655246 PMID:7744740
• この酵素はまた逆反応も触媒し、スフィンゴシンと脂肪酸からセラミドを合成します。基質としてD-エリスロスフィンゴシン、C12またはC14脂肪酸を好みます(PubMed:12764132, PubMed:12815059)。 関連文献: PMID:12764132 PMID:12815059
• ASAH1はN-アシルエタノールアミン加水分解酵素活性も示し、生理活性脂質シグナル伝達分子の制御に寄与しています(PubMed:15655246)。 関連文献: PMID:15655246
• 表皮におけるセラミド、スフィンゴシン、スフィンゴシン-1-リン酸の濃度を調節することで、ASAH1はカルシウム誘導性の表皮ケラチノサイト分化を媒介します(PubMed:17713573)。 関連文献: PMID:17713573
• ASAH1はセラミドとスフィンゴシンのバランスを介して、腫瘍壊死因子(TNF)誘導性アポトーシスを間接的に制御します（類似性による）。
• 副腎皮質細胞では、ASAH1は核内受容体NR5A1に結合してその転写活性を負に制御することで、ステロイド生成を直接調節している可能性があります(PubMed:22261821)。 関連文献: PMID:22261821
• 細胞内局在は主にリソソームですが、核、細胞質にも存在し、分泌されることもあります。
• ASAH1は広範囲で発現されており、心臓での発現量が高いです。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• 本抗体の免疫原(アミノ酸140～389番)は成熟酸セラミダーゼ配列の大部分をカバーしています。この設計により、全長前駆体とプロセシングされた型の両方を認識する抗体が得られている可能性があります。ご使用のサンプル系でアイソフォームの検出を検証することを推奨します。
• ウェスタンブロットの場合、予測分子量は約45 kDaですが、プロセシングにより低分子の断片が生成されることがあります。還元条件を使用し、特にヒト、マウス、ラットのライセートにおいて、適切なコントロールでバンドパターンを確認してください。
• IF/ICC実験では、リソソーム局在を維持するために最適な固定・透過処理条件を決定する必要があります。オルガネラマーカーとの共染色で特異性を確認することができます。
• 本抗体をELISAで使用する場合、ポリクローナルである性質を考慮して捕捉剤または検出試薬として使用してください。モノクローナル抗体とペアにすることでシグナル対ノイズ比が改善される可能性があります。ご使用のアッセイフォーマットに合わせてコーティングとブロッキング条件を最適化してください。

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