抗ATG4Aウサギポリクローナル抗体（WB、IF/ICC、ELISA用） - Q8WYN0

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：ATG4Aの機能と局在

• ATG4Aはオートファジーに必須なシステインプロテアーゼで、ATG8ファミリータンパク質のタンパク質分解による活性化と脱脂質化の両方を媒介します。 関連文献: PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651

• ATG4Aのプロテアーゼ活性により、ATG8タンパク質（MAP1LC3A、GABARAP、GABARAPL2を含む）のC末端残基が切断され、グリシンが露出します。これはオートファジー中にPEとの結合および膜への標的化を行うために必要なステップです。 関連文献: PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651

• ATG4AはPE結合型ATG8ファミリータンパク質の脱脂質化を触媒し、ATG4Bと比較して強い脱脂質活性を持つことから、ATG8タンパク質のリサイクルに寄与しています。 関連文献: PMID:29458288, PMID:33909989

• 脱ユビキチン化酵素様の機能を持ち、ATG8化を抑制し、ATG3などの複合体からATG8を切断します。 関連文献: PMID:31315929, PMID:33773106

• プロテアーゼ活性とは独立して、ATG4AはミトコンドリアへのATG9A輸送を制御し、脂質転移中のファゴフォアと小胞体の接触を促進することで、マイトファジーを調節します。 関連文献: PMID:33773106

• ATG4Aは細胞質に局在しており、これはオートファジーにおける役割と一致しています。

• ATG4A遺伝子は選択的スプライシングを受け、複数のアイソフォームを生成し、プロテオミクス研究で同定されています。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体の免疫原はヒトATG4Aのアミノ酸210～398番を含んでおり、この領域には機能的に関連するドメインが含まれる可能性があります。交差反応性データを解釈する際には、エピトープの保存性と種間相同性を考慮してください。
• 還元条件下でのウエスタンブロッティングでは、45 kDa付近にバンドが予測されます。陽性コントロールとして、ATG4Aの発現が確認されている適切な細胞または組織溶解物を使用してください。
• 免疫蛍光法または免疫細胞化学では、ATG4Aの細胞質局在が検出されるはずです。対象の細胞種に合わせて固定・透過処理プロトコルを最適化してください。
• ELISAへの応用は、組換えATG4Aタンパク質またはペプチド断片を用いて開発可能です。測定条件は実験的に最適化する必要がある場合があります。
• 本抗体はマウスおよびラットのオルソログと交差反応性を示すと記載しています。可能な場合はノックアウトまたはノックダウンモデルを用いて、対象種での特異性を検証してください。

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