WB、IF/ICC、ELISA用 Anti-ATP5F1 ポリクローナル抗体 - P24539

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：ATP5F1の機能と局在

• ATP5F1は、ミトコンドリア内膜を横切るプロトン勾配を利用してATPを合成する、酸化的リン酸化の鍵酵素であるミトコンドリアF1F0 ATP合成酵素（複合体V）のペリフェラルステークサブユニットbをコードします。 関連文献: PMID:37244256
• ATP合成酵素F(0)複合体サブユニットB1またはPIG47としても知られるこのタンパク質は、固定されたペリフェラルステークの必須成分であり、触媒中に回転要素に対して触媒性のα3β3サブ複合体およびサブユニットa/ATP6を静止状態に保持するステーターとして機能します。
• ATP合成酵素複合体は、可溶性のF1ヘッドドメイン（触媒コア）と膜に埋め込まれたF0ドメイン（プロトンチャネル）から構成され、これらは中心回転ステークとATP5F1を含むペリフェラルステークによって連結されています。
• 細胞内局在研究およびプロテオミクスデータは、ATP5F1がエネルギー変換における役割と一致して、ミトコンドリア内膜に存在することを確認しています。
• アセチル化などの翻訳後修飾がATP5F1上で同定されており、これらはATP合成酵素複合体の組み立てまたは活性を調節する可能性があります。
• このタンパク質は、CF(0)、水素イオン輸送、イオン輸送、ミトコンドリア内膜などのキーワードに分類されており、プロトン輸送とATP合成への直接的な関与を強調しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 使用した免疫原（残基1–245）は成熟タンパク質の大部分をカバーしており、天然および変性ATP5F1の両方を認識する抗体が得られる可能性があります。ミトコンドリア濃縮画分または全細胞溶解液での検出を検証することを検討してください。
• WBアプリケーションでは、約29 kDa付近のバンドが期待されます。一次抗体希釈率と露光時間を最適化して、低いバックグラウンドで明確なシグナルを得るように調整してください。
• IF/ICC実験では、特異性を確認するために、ミトコンドリアマーカー（例：MitoTrackerまたは既知のミトコンドリアタンパク質抗体）との共染色によってミトコンドリア局在を検証してください。
• ポリクローナル抗体であるため、ロット間で変動が生じる可能性があります。大規模な実験の前に、各新ロットを自身のアッセイシステムでパイロットテストすることをお勧めします。
• ELISAアプリケーションでは、適切なコーティング条件を使用し、プレート性能を検証するための陽性対照（例：組換えATP5F1タンパク質）を含めてください。

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