WB、IHC-P、ELISA用抗ATP6AP1ウサギモノクローナル抗体 - Q15904

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：ATP6AP1の機能と局在

• ATP6AP1（V型プロトンATPアーゼサブユニットS1）は、Ac45、XAP-3、ATP6S1としても知られ、液胞型H⁺-ATPアーゼ（V-ATPase）のV0複合体のアクセサリーサブユニットです。この複数サブユニットからなる酵素は、V1複合体によるATP加水分解とV0複合体によるプロトン輸送を共役させ、細胞内区画の酸性化を促進します。 関連文献： PMID:28296633 PMID:33065002
• 酸性化に加えて、V-ATPase複合体はRagulator複合体のグアニンヌクレオチド交換因子（GEF）活性を促進することで、リソソームにおけるmTORC1の活性化因子として機能し、mTORC1のリクルートを促進します。 関連文献： PMID:22053050
• ATP6AP1は、V-ATPaseを神経内分泌分泌小胞や破骨細胞の波状縁などの特殊な細胞内区画へ誘導し、その活性を調節します。また、膜輸送およびCa²⁺依存性膜融合にも関与します。 関連文献： PMID:27231034
• 好気的条件下では、ATP6AP1は細胞内鉄恒常性に寄与し、Fe²⁺プロリルヒドロキシラーゼ（PHD）酵素の活性を誘導します。これによりHIF1Aのヒドロキシル化が起こり、その後プロテアソーム分解が促進されます。 関連文献： PMID:28296633
• このタンパク質は、小胞体膜、ER-ゴルジ中間区画、ならびに分泌小胞、シナプス小胞、クラスリン被覆小胞など、さまざまな細胞質小胞に局在します。
• 広く発現しており、発現レベルは脳で最も高く、肝臓および十二指腸で最も低く、調節性分泌および細胞内輸送における役割と一致しています。
• ATP6AP1の変異は先天性糖鎖形成異常症（CDG）と関連しており、糖タンパク質のプロセシングにおける重要性を示しています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原（N末端ペプチド、アミノ酸1～100）はヒトとマウスで保存された領域を標的とするため、交差反応性が期待されます。発現量の高い脳組織ライセートなどの陽性対照を用いて、関連する試料系で検証してください。
• ウエスタンブロット（WB）では、約52 kDaのバンドが予想されます。標準的なIgG希釈倍率から開始し、実験的に最適化してください。特異性を確認するため、陰性対照（siRNAノックダウンまたはノックアウトライセートなど）の使用を推奨します。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、抗原賦活化処理を検討し、脳や膵臓などATP6AP1を発現することが知られている組織のホルマリン固定パラフィン包埋切片で試験してください。
• ELISAでは、この抗体を捕捉試薬または検出試薬として使用できます。ただし、別のクローンと組み合わせることで感度が向上する場合があります。抗体濃度を滴定し、最適なダイナミックレンジを確立してください。

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