WB、IF/ICC、ELISA用 抗ATP6V1E1 ポリクローナル抗体 - P36543

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：ATP6V1E1の機能と局在

• ATP6V1E1は、V型プロトンATPaseサブユニットE1をコードし、V-ATPase 31 kDaサブユニット (p31)、液胞プロトンポンプサブユニットE1、ATP6E/ATP6E2としても知られています。選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成される可能性があります。
• V-ATPaseの末梢V1複合体のサブユニットとして、ATP加水分解に参加し、膜を横切るプロトンの輸送を駆動することで、リソソーム、エンドソーム、分泌小胞などの細胞内区画を酸性化します (PubMed:32001091, PubMed:33065002)。 関連参考文献: PMID:32001091 PMID:33065002
• V-ATPaseはまた、特定の細胞タイプでは細胞膜にも局在し、細胞外酸性化とpH調節に寄与します (PubMed:32001091)。 関連参考文献: PMID:32001091
• V-ATPase複合体は、リソソーム膜上でRagulator複合体のグアニンヌクレオチド交換因子 (GEF) 活性を促進することにより、mTORC1活性化因子として機能し、それによってmTORC1のリクルートと同化シグナル伝達を促進します (PubMed:22053050, PubMed:39695235)。 関連参考文献: PMID:22053050 PMID:39695235
• 細胞内では、ATP6V1E1は頂端細胞膜、細胞質小胞膜 (シナプス小胞、クラスリン被覆小胞)、およびリソソーム膜上に存在します。
• このタンパク質は普遍的に発現しており、腎臓 (特に遠位ネフロン)、皮膚で高レベルに発現し、組織全体で広く検出されます (PubMed:29993276, PubMed:12036578, PubMed:28065471)。 関連参考文献: PMID:29993276 PMID:12036578 PMID:28065471
• 翻訳後修飾には、アセチル化とリン酸化が含まれ、プロテオミクス研究により示唆されており、これらはその組み立てまたは活性を調節する可能性があります。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトATP6V1E1のアミノ酸77-226に対応しており、この領域は種を超えてよく保存されているため、マウスおよびラットとの観察された交差反応性を支持します。
• ウェスタンブロッティングでは、約26kDaのバンドが期待されます。HeLaや腎臓組織ライセートなどの適切な陽性コントロールを使用し、陰性コントロールを含めることを検討してください。
• 免疫蛍光/ICCでは、この抗体は小胞構造およびおそらく細胞膜上のV-ATPaseを認識するはずです。各細胞タイプに対して、透過化と固定条件の最適化をお勧めします。
• ELISAアプリケーションでは、組換え免疫原またはペプチド断片をコーティング抗原として利用できます。選択したアッセイ形式での抗体の事前検証をお勧めします。
• ポリクローナル抗体として、選択的スプライシングに由来する複数のアイソフォームを検出する可能性があり、この特性は総ATP6V1E1レベルの検出に有利です。
• 供給者によってマウスおよびラットとの交差反応性が示されていますが、抗原アクセシビリティにおける種特異的な変動の可能性があるため、特定のサンプルシステムでの個別の検証をお勧めします。

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