Anti-AUH Rabbit Polyclonal Antibody for WB, ELISA - Q13825

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：AUHの機能と局在

• AUHはメチルグルタコニル-CoAヒドラターゼをコードしており、これはAU特異的RNA結合エノイル-CoAヒドラターゼとしても知られるミトコンドリア酵素です。ロイシン異化とRNA代謝の双方において重要な役割を果たします。
• ロイシン分解経路において、3-メチルグルタコニル-CoAを3-ヒドロキシ-3-メチルグルタリル-CoA (HMG-CoA) に水和触媒し、これはケトン体生成の重要なステップです (PubMed:11738050, 12434311, 12655555, 16640564)。
  関連参考文献：
  PMID:11738050 PMID:12434311 PMID:12655555 PMID:16640564
• 試験管内（in vitro）では、グルタコニル-CoA、クロトニル-CoA、3-メチルクロトニル-CoAを含むより広い基質特異性を示しますが、親和性は低くなります (PubMed:16640564)。
  関連参考文献：
  PMID:16640564
• mRNAのAU-richエレメント（ARE）に結合し、mRNAの安定性と分解を調節する役割を示唆しています (PubMed:7892223)。
  関連参考文献：
  PMID:7892223
• C5-ジカルボン酸分解経路においてイタコニル-CoAヒドラターゼとして機能し、マクロファージが産生する抗菌代謝物であるイタコン酸を解毒する可能性があります (PubMed:29056341)。
  関連参考文献：
  PMID:29056341
• 主にミトコンドリアマトリックスに局在しており、その代謝機能と一致しています。
• 翻訳後修飾にはアセチル化が含まれ、タンパク質は代替スプライシングを受けており、機能的多様性が加わります。
• AUHの遺伝的変異は疾患と関連しており、その臨床的重要性を強調しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 使用された免疫原はヒトAUHのアミノ酸68～339に相当し、成熟タンパク質の大部分をカバーしています。これにより、様々なアプリケーションにおいてネイティブおよび変性状態の双方の認識が促進される可能性があります。
• ウェスタンブロットでは、36 kDa（またはUniProtによる35.6 kDa）付近のバンドが期待されます。バンドの特異性を確認するために、AUH発現が確認されているミトコンドリア富化ライセートまたは細胞株をポジティブコントロールとして使用してください。
• ELISAでは、組換えAUHタンパク質または免疫原フラグメントによる直接コーティングをキャプチャー戦略として使用できます。サンドイッチELISAの開発には、異なるエピトープを認識する検出抗体とのペアリングを検討してください。
• 標的の特異性を確認するには、関連する細胞株におけるAUHのsiRNA介在性ノックダウンまたはCRISPRノックアウトを行い、WBでのシグナル消失を観察することをお勧めします。
• ヒト、マウス、ラットのAUH間で配列相同性が高いため、本抗体はこれらの種と交差反応する可能性があります。非ヒト系で作業する場合は、必ず適切な種由来のサンプルで反応性を検証してください。

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