WB、IP、ELISA対応 抗Bcl-2ポリクローナル抗体 - P49950

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：Bcl-2の機能と局在

• Bcl-2はBcl2遺伝子にコードされる主要な抗アポトーシスタンパク質で、因子依存性リンパ造血細胞や神経細胞を含む様々な細胞系においてプログラム細胞死を抑制します。
• ミトコンドリア膜透過性を制御することで細胞死を調節し、カスパーゼとのフィードバックループで機能します。ミトコンドリアからのシトクロムc放出を防ぐか、アポトーシス活性化因子APAF-1に結合することで、カスパーゼ活性を阻害します。
• アポトーシス以外にも、Bcl-2はオートファジーの阻害剤として働きます：非飢餓条件下でBECN1およびAMBRA1と相互作用し、オートファジー機能を抑制します。
• さらにNLRP1インフラマソームの活性化を妨げることで炎症を弱め、それによってCASP1の活性化とIL1Bの放出を低減する可能性もあります。
• 亜細胞レベルでは、Bcl-2はミトコンドリア外膜、核膜、小胞体膜および細胞質に局在します。
• 組織発現は広範囲にわたり、生殖組織で最も高いレベルが認められます。成体脳では、嗅球の僧帽細胞、海馬の顆粒細胞および錐体ニューロン、橋核、小脳顆粒ニューロン、上衣細胞に認められます。出生前脳では、神経上皮と皮質板での発現がより高くなります。
• 計算上の分子量は約26.6 kDaであり、リン酸化やユビキチン化（Ubl結合）などの翻訳後修飾を受けます。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 免疫原はラットBcl-2の1～100残基に対応する合成ペプチドを含むため、本抗体はN末端領域を認識することが示唆されます。この領域は種を超えて保存されている可能性があり、マウスとの交差反応性は確認されていますが、その他の種での使用については別途検証が必要です。
• ウエスタンブロット（WB）の場合、Bcl-2を発現するラットまたはマウスの組織/細胞由来の適切な陽性対照溶解物をロードし、~26 kDaの位置にバンドが検出されることを予想してください。通常は還元条件が使用されますが、必要に応じて条件の最適化を行ってください。
• 免疫沈降（IP）の場合、抗体量の滴定を行い、適切なアイソタイプ対照を含めてください。溶解物の事前清澄化により、非特異的結合を低減できます。
• ELISAの場合、本抗体は捕捉試薬または検出試薬として使用可能です。ご使用のアッセイフォーマットに適した二次抗体との組み合わせを検証してください。
• 特異性を評価するために、常に適切な陰性対照を含め、目的の内因性系での試験を検討してください。

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