細胞内フローサイトメトリー用Anti-BCL6モノクローナル抗体 () - P41182

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：BCL6の機能と局在

• BCL6 (B-cell lymphoma 6) は、胚中心の形成および抗体親和性成熟に重要な転写抑制因子であり、BCL6遺伝子 (GeneID: 604) によってコードされ、選択的スプライシングによって生成される複数のアイソフォームを持ちます。
• これはDNAコンセンサス配列 5'-TTCCTAGAA-3' に結合し、ヒストン脱アセチル化酵素を含むコリプレッサー複合体を募集して、GC B細胞における分化、アポトーシス、および細胞周期制御に関与する標的遺伝子をサイレンシングします。
• BCL6は自身の発現を自己制御し、miR-155などのマイクロRNAを抑制することで間接的にAICDAをアップレギュレートし、p53依存性アポトーシスを抑制しながら、免疫グロブリンクラススイッチ組換えおよび体細胞超変異を促進します。
• 濾胞ヘルパーT細胞 (TFH) において、BCL6はTFH遺伝子プログラムを駆動し、TH1、TH2、およびTH17系統への分化を抑制し、B細胞およびT細胞の両方における免疫学的記憶に不可欠です。
• また、CCL2やCCND2などの標的遺伝子上の結合モチーフについてSTAT5と競合することでマクロファージの増殖を抑制し、p53依存性および非依存性経路を介して、遺伝毒性ストレス下のGC B細胞で細胞周期停止を仲介します。
• 免疫系以外では、BCL6はHES5などの標的におけるNOTCH依存性転写を変化させることで神経発生を制御し、脱アセチル化酵素SIRT1を募集してエピジェネティックなサイレンシングと神経分化を誘導します。
• 細胞内では、BCL6はDNA結合転写因子としての役割と一致して、主に核に局在します。
• 翻訳後修飾にはリン酸化とアセチル化が含まれ、このタンパク質はN末端BTB/POZドメインとC末端亜鉛指を特徴とし、亜鉛指転写抑制因子に分類されます。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はアミノ酸235–350 (BTBドメイン外の中央領域) に対応しており、主要な2つのアイソフォーム (72 kDaおよび78 kDa) の両方を認識する抗体が得られる可能性があります。対象とする細胞型で特異性を検証してください。
• この抗体はABflo® 488で直接標識されているため、細胞内フローサイトメトリーに適しています。核内標的に対して十分なエピトープアクセシビリティを確保するため、固定および透過処理のステップを最適化してください。
• BCL6はGC B細胞の分化中に一過的に発現されるため、適切なゲーティング戦略を使用し、マーカー (CD38、CD20など) との共染色を検討して、ヒトサンプル中のGC B細胞またはTFH細胞を同定してください。
• 記録されている反応性はヒトに限定されているため、サンプルとの交差反応性を確認してください。ヒト以外の霊長類または他の種で作業する場合は、追加の検証を行ってください。

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