抗Beclin 1ウサギモノクローナル抗体（KOバリデーション済み）WB・ELISA用途 - Q14457

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：Beclin 1の機能と局在

• Beclin-1はクラスIIIホスファチジルイノシトール3-キナーゼ（PI3K）複合体のコアサブユニットとしてオートファジーに中心的な役割を持ち、ホスファチジルイノシトール3-リン酸の形成を媒介します。異なる複合体型（PI3KC3-C1およびPI3KC3-C2）が、それぞれオートファゴソームの開始と成熟を促進します（PubMed:18570871, PubMed:21358617, PubMed:23184933）。
  関連文献: PMID:18570871 PMID:21358617 PMID:23184933

• また、分解性エンドサイトーシス輸送、エンドサイトーシス、細胞質分裂の分離工程にも関与しており、これらはPI3KC3-C2の機能と関連していると考えられています（PubMed:20208530, PubMed:20643123, PubMed:23974797, PubMed:25275521）。
  関連文献: PMID:20208530 PMID:20643123 PMID:23974797 PMID:25275521

• Beclin-1は細胞質、ゴルジ装置、トランスゴルジネットワーク膜、エンドソーム膜、小胞体膜、ミトコンドリア膜、オートファゴソーム、核に広く局在しており、多様な輸送・シグナル伝達機能と一致しています。

• C末端の35kDaフラグメント（Beclin-1-C）は特異的にミトコンドリアに局在し、BAXの転座を誘導してアポトーシス促進因子を放出することで、アポトーシスを促進することができます。

• 抗ウイルス宿主防御に寄与しており、例えばシンドビスウイルスの神経毒株による感染に対して防御作用を示します。

• Beclin-1の発現は遍在的であり、細胞恒常性における基礎的な役割を裏付けています。

• 本タンパク質はリン酸化、アセチル化、ユビキチン化をはじめとする複数の翻訳後修飾を受け（キーワード：リンタンパク質、アセチル化、Ubl結合、イソペプチド結合）、オートファジーおよびアポトーシスにおける活性が調節されています。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 免疫原はN末端側280アミノ酸をカバーしており、重要な機能ドメインを含む設計のため、実験条件によっては全長Beclin-1（約52 kDa）と35 kDaのミトコンドリアアイソフォームの両方を検出することができます。
• ウエスタンブロッティングでは、ヒト、マウス、またはラットの細胞から調製した全細胞溶解液の使用を推奨します。予測分子量は52 kDaですが、翻訳後修飾によりバンドは60 kDa付近に検出される場合があります。可能な場合はノックアウト対照を用いてバリデーションを行ってください。
• ELISA用途では、直接ELISAまたはキャプチャーELISAで使用可能です。最適な使用希釈率は、対象のサンプルマトリックスを用いて実験的に決定してください。
• Beclin-1の発現はオートファジー刺激によって誘導されるため、陽性対照（例：飢餓処理またはラパマイシン処理した細胞）を用意することで、アッセイのバリデーションが容易になります。

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