WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用抗BRCA1ポリクローナル抗体 - P38398

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：BRCA1の機能と局在

• BRCA1は乳がん1型感受性タンパク質であり、RINGフィンガータンパク質かつE3ユビキチンタンパク質リガーゼとして機能します。特に「Lys-6」結合型ポリユビキチン鎖の形成を媒介し、これはDNA損傷修復とゲノム安定性に不可欠です。 関連文献: PMID:10500182, PMID:12887909, PMID:12890688

• BRCA1-BARD1ヘテロ二量体はDNA損傷修復、ユビキチン化、転写制御を調整し、ゲノムの完全性を維持します。 関連文献: PMID:12890688, PMID:14976165, PMID:20351172

• BRCA1は電離放射線誘発性のS期およびG2期における細胞周期停止に必要であり、適切なチェックポイント制御に寄与します。 関連文献: PMID:10724175, PMID:11836499, PMID:12183412

• 中心体微小管形成を調節し、染色体分離と有糸分裂の正確性に影響を与えます。 関連文献: PMID:18056443

• BRCA1はPALB2と相互作用することで相同組換え修復を促進し、DNA切断部位におけるBRCA2-RAD51のローディングを促進します。 関連文献: PMID:19369211

• さらにBRCA1は、不活性なリン酸化ACACAに結合することで脂質合成を阻害し、転写活性化因子として遺伝子発現を調節します。 関連文献: PMID:16326698, PMID:20160719

• このタンパク質はリン酸化およびアセチル化を受け、E3リガーゼ活性に必須なRING型ジンクフィンガードメインを含みます。BRCA1は主に核と染色体に局在し、一部は細胞質にも存在します。アイソフォーム1と3は広く発現していますが、アイソフォーム3は乳がんおよび卵巣がん細胞株でしばしば発現が低下するか欠失しています。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はアミノ酸901～1000番の領域に対応しており、この中心領域は全長BRCA1および一部のアイソフォームを認識する可能性があります。
• ウエスタンブロットでは、タンパク質分子量が約208 kDaと大きいため、BRCA1発現が既知の細胞株（例：HeLa、MCF-7）の全細胞溶解液の使用を推奨します。適切なゲル電気泳動および転写条件を確保してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、抗原賦活化が必要な場合があります。標準プロトコルに従って、凍結組織またはパラフィン包埋組織で抗体を検証してください。
• 免疫蛍光/ICCでは、核および細胞質での検出のために固定・透過処理条件を最適化する必要があります。
• ELISAは組換えBRCA1断片の検出または抗体スクリーニングに使用できます。サンドイッチELISAにはペア抗体戦略を検討してください。

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