WB、IHC-P、ELISA用抗BTKポリクローナル抗体 - Q06187

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：BTKの機能と局在

• BTK（Bruton型チロシンキナーゼ）は、Bリンパ球の発生、分化、シグナル伝達に不可欠な非受容体型チロシンキナーゼです。B細胞抗原受容体（BCR）が結合すると、BLNKと協調してPLCG2をリン酸化し、下流のカルシウム動員およびプロテインキナーゼCの活性化を開始します。 関連文献： PMID:11606584
• 多様な経路を橋渡しするシグナル伝達プラットフォームとして機能し、サイトカイン受容体シグナル伝達およびToll様受容体（TLR）経路に関与し、自然免疫と適応免疫において重要な役割を果たします。 関連文献： PMID:16517732 PMID:17932028
• TLR経路において、BTKは脾臓B細胞のTLR9活性化を制御し、TIRAPのチロシンリン酸化を媒介してその分解を引き起こします。 関連文献： PMID:16415872 PMID:16517732 PMID:17932028
• TLR8/9シグナル伝達を介してNF-kappa-B活性を誘導し、数百の遺伝子の転写を制御します。また、転写因子GTF2Iを一過性にリン酸化し、その核移行と遺伝子発現の調節を促進します。 関連文献： PMID:19290921 PMID:9012831
• ARID3AおよびNFATを介した転写制御に寄与します。機能的なARID3A DNA結合複合体の形成に必要ですが、直接的なDNA結合は実証されていません。 関連文献： PMID:16738337
• アポトーシス制御において二重の役割を示し、DDX41をリン酸化することで、STING1を介したI型インターフェロン応答にも関与します。 関連文献： PMID:9751072 PMID:25704810
• 細胞質、細胞膜、核、膜ラフトなどに局在し、その動的なシグナル伝達機能を反映しています。主にBリンパ球で発現します。
• タンパク質の特徴として、SH2、SH3、PHドメイン、ジンクフィンガーモチーフ、キナーゼドメインを有します。リン酸化やアセチル化などの翻訳後修飾により、その活性が調節されます。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原は、膜標的化とタンパク質間相互作用を媒介するN末端PHおよびTHドメイン（アミノ酸30～240）にまたがっています。これにより、リン酸化型および非リン酸化型のBTKの両方を認識できる可能性があります。
• ウエスタンブロットでは、約76 kDaのバンドが予想されます。Bリンパ球細胞株（例：Ramos、Raji）および適切なローディングコントロールを用いて発現を確認してください。
• IHC-Pでは、熱誘導エピトープ賦活化を検討し、脾臓やリンパ節などのB細胞が豊富な組織で染色パターンを確認してください。アイソタイプコントロールの使用を推奨します。
• ELISAでは、抗体を滴定して最適なコーティング濃度および検出濃度を決定してください。マウスおよびラットBTKとの交差反応性により、多種動物を用いた研究が容易になる可能性があります。
• BTKは非B細胞では低レベルで発現することに注意してください。偽陰性を避けるため、適切なサンプルコントロールを含めることを推奨します。

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