WB、ELISA用抗カルパイン1ウサギポリクローナル抗体 - P07384

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：Calpain 1の機能と局在

• Calpain-1は、細胞骨格のリモデリングおよびシグナル伝達に関与する基質の限定的なタンパク質分解を触媒する、カルシウム制御性の非リソソーム性チオールプロテアーゼです。
  関連文献：
  PMID:19617626 | PMID:21531719 | PMID:2400579
• この酵素はCTBP1をAsn-375、Gly-387、His-409の位置でタンパク質分解的に切断し、カスパーゼ7（CASP7）を活性化してアポトーシスを制御します。
  関連文献：
  PMID:23707407 | PMID:19617626
• Calpain-1は細胞質および細胞膜の両方に局在し、膜近傍のシグナル伝達イベントにおける機能を促進します。
• ヒト組織で広範に発現しており、ハウスキーピング機能および調節機能における重要性を示しています。
• ペプチダーゼC2ファミリーのメンバーとして、カルパイン-1はシステイン活性部位と複数のEFハンド型カルシウム結合ドメインを有します。
• 翻訳後修飾にはアセチル化、自己触媒的切断、リン酸化が含まれ、これらがその活性を調節します。
• CAPN1遺伝子の変異は常染色体劣性遺伝性痙性対麻痺（SPG76）と関連しており、神経の健康維持における本遺伝子の重要性を示しています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• ウェスタンブロッティング（WB）では、バンドの特異性を確認するため、組換え免疫原（アミノ酸20～330）を陽性対照として使用することを検討してください。
• Calpain-1の活性は厳密にカルシウム依存性であるため、プロテアーゼを活性構造に維持するために、溶解バッファーおよびアッセイバッファーに十分なCa²⁺を含めてください。
• 野生型細胞とCAPN1ノックアウトまたはノックダウン細胞のライセート中のシグナルを比較して、抗体の特異性を検証してください。
• ELISAで使用する場合は、精製Calpain-1タンパク質を用いてコーティングおよび検出条件を最適化してください。本抗体はサンドイッチ法における捕捉試薬または検出試薬のいずれとしても使用できます。

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