WB、ELISA用抗CARD8ポリクローナル抗体 - Q9Y2G2

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：CARD8の機能と局在

• CARD8（カスパーゼリクルートメントドメイン含有タンパク質8）は、CARDINAL、TUCAN、NDPP1、DAKAR、DACAR、NDPPとしても知られ、CARD含有タンパク質ファミリーのメンバーです。
• CARD8はインフラマソームセンサーとして機能し、HIV-1プロテアーゼ活性やVal-boroPro阻害剤などの病原体／損傷シグナルを認識し、インフラマソームの活性化を媒介します。これにより、CD4+ T細胞およびマクロファージのパイロトーシスが引き起こされます。
  関連文献： PMID:11408476、PMID:11821383、PMID:15030775、PMID:32840892、PMID:33542150、PMID:36357533
• 全長タンパク質はFIINDドメイン内で自己タンパク質分解プロセシングを受け、N末端フラグメントとC末端フラグメントを生成します。これらは刺激がない状態では非共有結合的に結合しています。
• 病原体を検出すると、N末端フラグメントがユビキチン化され、プロテアソームによって分解されます。これによりC末端フラグメントが放出されてCARD8インフラマソームを形成し、プロカスパーゼ1を直接リクルートしてその活性化を促進します。その結果、GSDMDの切断とパイロトーシスが引き起こされます。
  関連文献： PMID:32558991、PMID:32051255、PMID:32840892、PMID:33053349、PMID:34019797
• インフラマソームにおける役割に加え、CARD8はNF-kappa-Bの活性化およびNLRP3インフラマソームの負の制御因子としても機能します。
  関連文献： PMID:11551959、PMID:12067710、PMID:24517500
• CARD8は細胞質、核、および形成されたインフラマソーム複合体に局在します。
• CARD8は肺、卵巣、精巣、胎盤で高発現し、心臓、腎臓、肝臓では発現量が低くなっています。また、脾臓、リンパ節、骨髄でも発現しています。
  関連文献： PMID:11551959、PMID:11821383
• CARD8はHIV-1に対する宿主防御において役割を果たします。HIV-1プロテアーゼ活性を感知し、ウイルス再活性化後の潜伏ウイルスの排除を引き起こします。一方、HIV-1は感染細胞内でプロテアーゼを不活性な状態に維持することで、この認識を回避できます。
  関連文献： PMID:33542150

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はN末端のアミノ酸1～200領域に相当するため、この抗体は全長CARD8およびそのN末端フラグメントを認識する可能性があります。細胞ライセート中の自己タンパク質分解プロセシング産物を解析して、特異性を確認することを検討してください。
• ウェスタンブロットでは、CARD8の発現が確認されているヒト細胞株または組織（例：THP-1マクロファージ、肺または卵巣ライセート）を使用してください。予測される全長タンパク質は約61 kDaですが、切断フラグメントも検出される可能性があります。適切な陽性および陰性対照を含めてください。
• ELISAでは、この抗体をサンドイッチ法または間接法に使用できます。アッセイの特異性を確保するため、CARD8の別のエピトープを認識する検出抗体と組み合わせてください。
• このポリクローナル抗体はヒトCARD8に対してバリデーションされていますが、他種との交差反応性については実験的に検証する必要があります。CARD8の動態を研究するため、関連する感染モデルでインフラマソーム活性化因子（例：Val-boroPro）またはHIV-1プロテアーゼ阻害剤の使用を検討してください。

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