WB、IF-P、ELISA用 抗Caspase-1 ポリクローナル抗体 - P29466

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: Caspase-1の機能と局在

• Caspase-1は、インターロイキン-1β転換酵素(ICE)またはp45としても知られるチオールプロテアーゼであり、システイン-アスパラギン酸プロテアーゼ(カスパーゼ)ファミリーの主要メンバーです。
• インフラマソーム複合体内で活性化されると、プロ-IL-1βおよびプロ-IL-18をプロテオリティックに切断して活性型の成熟型に変換し、炎症反応を開始します。 関連文献: PMID:15326478 PMID:15498465 PMID:1574116
• ガスダーミン-D (GSDMD)を切断してパイロトーシス細胞死を引き起こし、基質認識は厳密なコンセンサス切断部位ではなく、エキソサイト界面に依存しています。 関連文献: PMID:26375003 PMID:32051255 PMID:32109412 PMID:32553275
• 追加の基質には、細菌感染時にプラズマ膜修復を促進するために切断されるCASP7；DNAウイルス感染時に不活性化されるCGAS；およびアポトーシス細胞で放出されるSPHK2が含まれます。 関連文献: PMID:22464733 PMID:28314590 PMID:20197547
• 主に細胞質に局在し、細胞膜と関連しています。
• Caspase-1は脾臓と肺で高発現しており、肝臓、心臓、小腸、結腸、胸腺、前立腺、骨格筋、末梢血白血球、腎臓、精巣では低発現です；脳では発現が見られません。
• このタンパク質は45 kDaの酵素前駆体から自己タンパク質分解により成熟し、リン酸化、イソペプチド結合形成、ユビキチン様結合を受けます。選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成されます。

実験ガイドと技術的ヒント

• 免疫原はヒトプロ-カスパーゼ-1のp20サブユニット内の領域に対応しており、この抗体が全長45 kDaの酵素前駆体とその処理断片の両方を認識できることを示唆しています。ウェスタンブロットでは、インフラマソーム活性化剤（例：LPS/ATP）で処理した細胞のライセートをプローブして、カスパーゼ-1の活性化を観察することを検討してください。
• 免疫蛍光法(IF-P)では、既知のCASP1発現を持つ細胞株または組織（例：THP-1マクロファージ、脾臓）で抗体を検証し、細胞質および膜局在プールを検出するために透過化処理を最適化してください。
• ELISAでは、カスパーゼ-1の定量化のために抗体を捕捉または検出試薬として使用してください；関連するサンプルマトリックスにおいて、組換えヒトCASP1に対する反応性およびマウス/ラット相同体との交差反応性を確認してください。

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