ウエスタンブロットおよびELISA用 抗カスパーゼ-2 ウサギポリクローナル抗体 - P42575

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：カスパーゼ-2の機能と局在

• カスパーゼ-2（公式記号CASP2）はカスパーゼファミリーに属するチオールプロテアーゼであり、ICH-1およびNEDD-2としても知られています。CASP2遺伝子は選択的スプライシングを受け、複数のアイソフォームを産生します。
• アポトーシスカスケードの主要な調節因子として機能し、下流カスパーゼの活性化または生存タンパク質の不活性化を介して細胞死を実行します（PubMed:11156409, PubMed:15073321, PubMed:8087842）。カスパーゼ-2はPIDD1およびCRADDと会合してPIDDosome複合体を形成し、遺伝毒性ストレスに応答してアポトーシスを引き起こします（PubMed:15073321）。
  関連参考文献： PMID:11156409 PMID:15073321 PMID:8087842
• カスパーゼ-2はアポトーシスにおいて二面的な役割を示し、正および負の調節因子として機能するとともに、カスパーゼ活性化と細胞死を抑制する内在性阻害剤として働く可能性があります（PubMed:15073321）。
  関連参考文献： PMID:15073321
• このタンパク質は、心臓や脳と比較して、胚の肺、肝臓、腎臓でより高く発現しています。成体組織では、胎盤、肺、腎臓、膵臓で高い発現が観察されます。
• カスパーゼ-2は、リン酸化やアセチル化などの重要な翻訳後修飾を受けます。また、最初は不活性な酵素前駆体として合成され、活性化にはプロテアーゼによる切断処理が必要です。
• CASP2遺伝子の変異は、知的障害や滑脳症などの疾患バリアントと関連しており、神経発達におけるその重要な役割が強調されています。

実験ガイドラインおよび技術的ヒント

• ウエスタンブロット（WB）では、カスパーゼ-2陽性の細胞株または組織のライセートを使用して抗体を検証し、特異性を確認するためにカスパーゼ-2ノックダウンまたはノックアウトの陰性対照を含めることを検討してください。予測分子量は約51 kDaです。適切なタンパク質マーカーを使用し、サンプル調製中のカスパーゼ-2分解を防ぐためにライシスバッファーにプロテアーゼ阻害剤を添加することを考慮してください。
• ELISAアプリケーションでは、フルレングスの組換えタンパク質または免疫原フラグメントを使用してコーティング条件を最適化し、非特異的結合を最小限に抑えるために適切なブロッキングを確保してください。
• マウスおよびラットとの交差反応性が報告されているため、関連する組織ライセートまたは組換えタンパク質をテストすることで、これらの種における抗体の反応性を確認してください。
• カスパーゼ-2はアポトーシス誘導に関与しているため、活性化されたカスパーゼ-2の形態を濃縮し検出感度を高めるために、既知のアポトーシス誘導剤（例：DNA損傷剤）で細胞を処理してください。

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