WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用 抗Caspase-9 ポリクローナル抗体 - P55211

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景: Caspase-9の機能と局在

• Caspase-9は、アポトーシスプロテアーゼMch-6 (MCH6)、APAF-3、またはICE-LAP6としても知られ、システイン-アスパラギン酸プロテアーゼ（カスパーゼ）ファミリーの一員であり、ヒトではCASP9遺伝子によってコードされています。
• これは内因性アポトーシス経路において開始カスパーゼとして機能します。シトクロムcの放出とApaf-1アポトソーム形成に伴い、caspase-9はリクルートされて活性化され、続いてエフェクターカスパーゼ-3および-7を切断・活性化します。また、ポリ(ADP-リボース)ポリメラーゼ (PARP) を切断し、ABL1依存的な方法でDNA損傷誘導性アポトーシスを促進します。さらに、caspase-9は、DIABLO/SMACを介したBIRC6-カスパーゼ複合体の阻害後にBIRC6をプロテオリティックに切断します。 関連参考文献: PMID:36758105 PMID:36758106
• CASP9の選択的スプライシングにより、触媒的に不活性なアイソフォームが生成され、これはcaspase-9シグナリングのドミナントネガティブ阻害剤として機能します。
• Caspase-9は遍在的に発現しており、特に心筋細胞に特異的に見られる心臓で最も高いレベルを示します。中等度の発現は、肝臓、骨格筋、膵臓で観察されます。
• 翻訳後修飾には、プロテオミクスデータが示すように、その活性、安定性、および他のタンパク質との相互作用を調節するリン酸化とユビキチン様結合が含まれます。
• このタンパク質は不活性な酵素前駆体として合成され、活性化にはプロテオリティックな処理が必要です。チオールプロテアーゼとして、加水分解に触媒システイン残基を使用し、アポトーシス関連加水分解酵素に分類されます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• この抗体に使用された免疫原は、ヒトcaspase-9 (NP_001220.2)のアミノ酸139–416に対応しています。この領域は大きな触媒ドメインの一部をカバーし、フルレングス型と切断型の両方を認識する可能性があります。ウェスタンブロットでは、プロ型に対して約46 kDaのバンドが検出され、サンプル処理に応じて切断断片に対応する追加のバンドが検出される場合があります。
• この抗体は、ウェスタンブロット (WB)、免疫蛍光/免疫細胞化学 (IF/ICC)、免疫組織化学 (IHC-P)、およびELISAに推奨されます。研究者は希釈を最適化し、特にヒト、マウス、ラットのサンプルを扱う際には、適切な陽性対照と陰性対照を含める必要があります。
• Caspase-9は主に細胞質タンパク質であり、アポトーシス時にミトコンドリアに移行するため、細胞内局在は変化する可能性があり、IF/ICCまたはIHC-Pのための固定/透過化条件はそれに応じて調整すべきです。

CamelBio: ワンストップ調達の架け橋

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