抗カテプシンK (CTSK) ポリクローナル抗体 (WBおよびELISA用) - P43235

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：カテプシンKの機能と局在

• カテプシンK (CTSK) は、カテプシンO、O2、またはXとも呼ばれ、パパインファミリーに属するリソソームシステインプロテアーゼであり、不活性なチモーゲンとして合成され、タンパク質分解によって活性化されます。
• I型コラーゲンを含む骨基質タンパク質を分解することで破骨細胞による骨吸収に重要な役割を果たしており、正常な骨リモデリングに不可欠です。
• CTSKは酸性pH下でフィブリノーゲンに対して強力なエンドプロテアーゼ活性を示し、骨以外の細胞外マトリックス分解における役割が示唆されています。
• 甲状腺において、CTSKは甲状腺濾胞内腔でのチログロブリンの限定的なタンパク質分解を通じて、甲状腺ホルモン（T4）の放出に関与しています (PubMed:11082042)。 関連文献: PMID:11082042
• このタンパク質は主に破骨細胞 (PubMed:7805878) および甲状腺上皮細胞 (PubMed:11082042) に発現しています。 関連文献: PMID:7805878, PMID:11082042
• 細胞内局在として、CTSKはリソソームに局在し、細胞外空間に分泌され、極性細胞の頂端細胞膜に関連することもあります。
• 翻訳後修飾にはグリコシル化やジスルフィド結合形成が含まれ、これらは安定性と活性に重要です。成熟酵素は糖タンパク質です。
• CTSKの変異は、骨硬化（骨が密になる）を特徴とする常染色体劣性遺伝性骨疾患であるピクノディソストーシス（濃縮異骨症）に関連しています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原は成熟触媒ドメインを含む組換え断片（aa 115-329）に対して生成されたため、本抗体は変性ウェスタンブロット（WB）条件下でプロ型と活性型成熟CTSKの両方を認識すると予想されます。ただし、内在性タンパク質の検出には組織の発現レベルに応じた最適化が必要な場合があります。
• ウェスタンブロット解析では、還元条件の使用を検討し、サンプル調製中にCTSKの分解を防ぐためにプロテアーゼ阻害剤を添加してください。プロ酵素の予測分子量は約37 kDaですが、成熟した切断型はより小さく見える場合があります。
• 報告されているマウスとの交差反応性は、骨代謝のマウスモデルを用いたトランスレーショナル研究における有用性を示唆しています。特定の実験系で交差反応性を検証してください。
• ELISAの場合、本抗体をキャプチャー抗体とペアにするか、直接標識して検出することを検討してください。ポリクローナル抗体であるため、ロット間の整合性を確認する必要があります。
• CTSKは酸性pHで最適活性を示すため、免疫組織化学や酵素活性アッセイなどのアプリケーションでは、酸性バッファー条件が抗原抗体反応を促進する可能性があります。

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