WB、IHC-P、ELISA用抗カテプシンL/V/K/Hウサギモノクローナル抗体 - P07711/O60911/P43235/P09668

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：カテプシンLの機能と局在

• チオールプロテアーゼであるカテプシンLは、リソソーム内における一般的なタンパク質代謝回転に不可欠です。胸腺上皮細胞での抗原プロセシング、骨リモデリング、チログロブリンからの甲状腺ホルモンであるチロキシンのタンパク質分解的放出など、多様なプロセスに関与します。
• カテプシンLは中性pHでエラスチンを分解し、抗原提示細胞の細胞外空間に蓄積して、炎症時の細胞外マトリックスリモデリングに寄与します。また、コラーゲンXVIIIから血管新生阻害因子エンドスタチンを生成します。 関連文献： PMID:10716919
• TMPRSS2を欠く細胞では、カテプシンLがリソソーム内でスパイク糖タンパク質を切断することにより、SARS-CoV、SARS-CoV-2およびその他のコロナウイルスの侵入を促進し、膜融合を可能にします。 関連文献： PMID:16339146
  PMID:18562523
  PMID:32142651
  PMID:16081529
  PMID:26953343
• 別の翻訳開始により、シグナルペプチドを欠くアイソフォームが産生されます。これらは核に局在し、CUX1転写因子を切断することで、細胞周期の進行を調節します。 関連文献： PMID:15099520
• カテプシンLは主にリソソームに局在しますが、細胞の頂端膜、分泌小胞（例：クロム親和性顆粒）、細胞外空間、および特定の条件下では核にも存在します。
• 主な翻訳後修飾には、グリコシル化およびジスルフィド結合形成が含まれます。この酵素は不活性なザイモジェン（プロカテプシンL）として合成され、タンパク質分解的切断によって活性化されます。成熟型はSDS-PAGE上で約38 kDaに泳動される一方、全長前駆体は約37.6 kDaです。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトカテプシンLの保存領域（アミノ酸50～150）に由来する合成ペプチドであり、これがカテプシンV、K、Hとの交差反応性の要因と考えられます。結果を解釈する際には、複数のファミリーメンバーが検出される可能性を考慮してください。
• ウェスタンブロッティングでは、還元条件下で38 kDa付近のバンドが予想されます。プロカテプシンL（約37.5 kDa）およびそのプロセシング産物も、サンプル調製法や細胞のコンテキストによっては可視化される場合があります。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、ホルマリン固定組織内のエピトープを露出させるために抗原賦活化法が必要となる場合があります。賦活化条件（例：クエン酸緩衝液とEDTA緩衝液の選択、pH、加熱条件）の最適化が推奨されます。
• ELISAでは、本抗体は捕捉試薬または検出試薬として適している可能性があります。適切なサンプルマトリックス（例：細胞ライセート、組織抽出物、または生体液）でバリデーションを行い、組換えタンパク質コントロールを用いて特異性を確認してください。
• 免疫細胞や上皮細胞を含む幅広い組織および細胞種で発現しているため、適切な陽性および陰性コントロールを含めてください。ウイルス侵入に関する研究では、カテプシンLが酸性区画で作用することに注意してください。特異性の確認には、ロイペプチンやE-64などの阻害剤を使用できます。

CamelBio：ワンストップ調達の架け橋

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