ウエスタンブロット、ELISA用 抗CCL3 (MIP-1-アルファ) ウサギポリクローナル抗体 - P10147

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：CCL3の機能と局在

• CCL3は、マクロファージ炎症性タンパク質1-アルファ (MIP-1-アルファ) またはsmall-inducible cytokine A3としても知られ、炎症性および走化性の特性を持つ分泌型ケモカインです。
• ケモカイン受容体CCR1、CCR4、CCR5への結合を介して効果を発揮し、白血球の遊走と活性化を調節します。
• CCL3は、CD8+ T細胞によって産生される主要なHIV抑制因子として同定されており、用量依存的にHIV-1、HIV-2、およびサル免疫不全ウイルス (SIV) の複製を阻害することができます。
• このタンパク質はCCケモカインファミリーに分類され、ジスルフィド結合を形成する保存されたシステイン残基を持ち、分泌のためのシグナルペプチドを含みます。
• 細胞内局在としては、CCL3は可溶性シグナル分子としての役割に一致して、細胞外空間に分泌されます。
• 約10 kDaの分子量を持つCCL3は、プロテオミクス同定および直接タンパク質配列決定研究に関与しており、研究におけるその重要性を浮き彫りにしています。
• UniProtのキーワードリストには「走化性」、「サイトカイン」、「炎症応答」が含まれており、免疫調節におけるその機能的分類が強調されています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 使用された免疫原は、シグナルペプチドを欠くヒトCCL3の成熟型 (アミノ酸23-92) に対応しているため、この抗体は処理された分泌型のタンパク質を認識することが期待されます。
• ウエスタンブロッティングでは、内在性タンパク質の予測分子量が~10 kDaであることを考慮し、適切な低分子量転写条件を確保し、エピトープをマスクする可能性のある過度の固定を避けてください。
• CCL3は分泌型サイトカインであるため、細胞溶解物での検出は限定的である可能性があります。条件付き培地を濃縮するか、刺激した細胞を使用することで感度が向上する場合があります。
• ELISAでは、このポリクローナル抗体は捕捉または検出試薬として機能する可能性があります。組換えタンパク質標準品を用いて、コーティングおよび検出条件の最適化をお勧めします。
• CCケモカイン間の配列保存性が高いことを考慮し、特に関連するファミリーメンバーとの交差反応性が懸念される場合は、ご自身のサンプルシステムでの特異性を確認してください。

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