WB、ELISA用抗CD117ウサギポリクローナル抗体 - P05532

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD117の機能と局在

• CD117はc-Kitまたはマスト/幹細胞増殖因子受容体Kitとしても知られ、プロト癌遺伝子Kit（SWISS: P05532）にコードされる受容体型チロシンキナーゼです。細胞外に免疫グロブリン様ドメイン、細胞内にキナーゼドメインを持つIII型受容体型チロシンキナーゼファミリーに分類されます。
• リガンドであるKITLG/SCFが結合すると、CD117は二量体化して自己リン酸化を起こし、PI3K-AKT、RAS-MAPK/ERK、JAK-STATを含む下流シグナル伝達経路を活性化します。これらのカスケードは細胞生存、増殖、造血、幹細胞維持、配偶子形成、メラニン生成、肥満細胞の発達を調節します。
• 選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが存在します。アイソフォーム1とアイソフォーム2は骨髄および精原細胞に存在し、アイソフォーム3は造血幹細胞に濃縮され、精子形成の後期段階でも検出されます。
• 亜細胞レベルではCD117は主に細胞膜に局在しますが、活性化時または受容体の代謝回転中に内部化され、細胞質で検出されることもあります。
• 翻訳後修飾には、グリコシル化、ジスルフィド結合形成、ユビキチン化、チロシン残基の広範なリン酸化が含まれます。これらの修飾は受容体の活性、安定性、シグナル伝達出力を調節します。
• CD117は造血幹細胞、肥満細胞、メラノサイト、生殖細胞、カハール介在細胞に広く発現しています。変異や異常発現は、肥満細胞症、消化管間質腫瘍、白血病など様々な病態と関連しています。
• CD117に関連するキーワード：選択的スプライシング、ATP結合、細胞膜、細胞質、疾患変異体、ジスルフィド結合、糖タンパク質、免疫グロブリンドメイン、キナーゼ、マグネシウム、膜、金属結合、ヌクレオチド結合、リンタンパク質、プロト癌遺伝子、受容体、参照プロテオーム、リピート、シグナル、トランスフェラーゼ、膜貫通、膜貫通ヘリックス、チロシンタンパク質キナーゼ、Ubl抱合

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 本ポリクローナル抗体は、マウスCD117のアミノ酸25～523（細胞外ドメインに相当）を含む組換え免疫原を用いて作製されました。受容体の天然型および変性型の両方を認識する可能性があります。
• ウェスタンブロッティングでは、CD117の予測分子量は約109 kDaです。グリコシル化により、観測されるバンドはわずかに高く出現したり、拡散したバンドとして見られる場合があります。十分なタンパク質マーカーを使用し、適切なコントロールを用いて特異的バンドを検証してください。
• ELISA用途では、間接法またはサンドイッチ法を検討してください。ポリクローナルであるため高い感度が得られる可能性がありますが、CD117陰性のライセートや利用可能な場合はノックアウトサンプルで試験を行い、特異性を確認してください。
• 本抗体はマウスCD117と交差反応します。ヒトサンプルや他の種での研究に使用する場合は、配列相同性を確認し、予備実験を行って交差反応性を評価してください。
• ポリクローナル抗体のため、ロット間の一致性にばらつきが生じる場合があります。新しいバッチごとにご使用のアッセイ系で適格性を確認し、使用する希釈度を最適化することを推奨します。

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