WB、IHC-P、IF/ICC用抗CD146/MCAMウサギモノクローナル抗体 - P43121

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD146/MCAMの機能と局在

• CD146/MCAM（MUC18、MelCAM、HEMCAMとしても知られる）は、MCAM遺伝子にコードされる細胞表面糖タンパク質であり、接着分子の免疫グロブリンスーパーファミリーに属します。
• カルシウム非依存的な細胞間接着を媒介し、細胞間結合部における内皮細胞単層の完全性の維持に重要な役割を果たします。
• メラノーマ細胞上での発現により血管内皮との相互作用が促進され、血行性播種および転移が促進されます。
• 胚発生中、CD146/MCAMは移動中の神経堤細胞において接着分子として機能する可能性があります。
• リガンドの結合により、FYNおよびPTK2/FAK1のチロシンリン酸化と細胞内カルシウムの一過性上昇が誘導され、シグナル伝達における役割が示唆されます。
• 正常な成人組織では、CD146/MCAMの発現は主に血管平滑筋細胞および内皮細胞に限局しています。
• 本タンパク質は進行した原発性メラノーマおよび転移性メラノーマで高発現しますが、良性母斑ではほとんど検出されず、腫瘍進行との相関が認められます。
• 翻訳後修飾にはリン酸化およびN結合型糖鎖付加が含まれ、本タンパク質にはジスルフィド結合した免疫グロブリン様反復配列と膜貫通ドメインが含まれます。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトCD146/MCAMの細胞外ドメイン（アミノ酸24～559）に相当するため、適切なサンプルでは全長タンパク質および可溶性の遊離型を検出できると予測されます。
• ウエスタンブロットでは、予測されるバンドは約72 kDaです。ただし、糖鎖修飾により観察される分子量はより大きくなる可能性があります。変性条件および還元条件の使用を検討してください。
• 免疫蛍光（IF/ICC）では、膜局在が顕著に認められるはずです。細胞内エピトープへのアクセスが必要な場合は、適切な透過処理を行ってください。ただし、細胞外ドメインを標的とするため、生細胞染色も可能な場合があります。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、抗原賦活化法および条件の最適化が必要となる場合があります。血管内皮およびメラノーマ組織での発現が予想されます。
• ELISAが用途として記載されていますが、適切な捕捉抗体／検出抗体と組み合わせて使用してください。エンドユーザーは、各自のアッセイ形式で抗体を検証する必要があります。
• 交差反応性はヒトで検証されています。その他の種については、配列相同性解析および実験的検証を実施してください。

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