フローサイトメトリー用 抗CD4モノクローナル抗体 - P01730

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：CD4の機能と局在

• CD4は免疫グロブリンスーパーファミリーに属する膜貫通型糖タンパク質で、4つのIg様ドメイン（D1～D4）を持つ細胞外領域、1本の膜貫通ヘリックス、短い細胞質テイルから構成されています。主にヘルパーT細胞の表面に発現しているほか、単球、マクロファージ、樹状細胞、NK細胞にも発現しています。
• ヘルパーT細胞では、CD4はMHCクラスII分子の共受容体として機能します。抗原提示細胞上のMHCクラスIIの非多型領域に結合し、T細胞受容体（TCR）とペプチド-MHC複合体の相互作用を安定化させます。これは抗原認識とT細胞活性化に不可欠です。
• TCRが抗原を認識すると、CD4は細胞質テイルを介してSrcファミリーキナーゼLCKをTCR-CD3複合体の近傍に動員します。LCKはCD3鎖上の免疫受容体チロシン系活性化モチーフ（ITAM）をリン酸化し、細胞内シグナル伝達カスケードを開始して、T細胞の増殖、サイトカイン産生、分化へと導きます。
• 適応免疫における役割に加え、CD4はウイルスエンベロープ糖タンパク質gp120との相互作用を介して、1型ヒト免疫不全ウイルス（HIV-1）の主要受容体として機能します。また、ヒトヘルペスウイルス7（HHV-7）の受容体としても働きます。HIV-1のVpuタンパク質およびNefタンパク質はCD4の表面発現をダウンレギュレートし、ウイルスの放出と免疫回避を促進します。 関連文献: PMID:12089508 PMID:16331979 PMID:2214026 PMID:17346169 PMID:7909607
• CD4は翻訳後修飾として、N結合型グリコシル化、ジスルフィド結合形成、膜近傍システインでのパルミトイル化、LCKによるリン酸化を受けます。これらの修飾は、タンパク質のフォールディング、膜局在、シグナル伝達を制御しています。
• CD4の発現はヘルパーT細胞の特徴的な性質であり、T細胞サブセット同定のための免疫表現型マーカーとして広く用いられています。その表面発現密度は、細胞の活性化・分化状態に応じて変化することがあります。
• マクロファージやNK細胞では、CD4が結合するとTCR/LCK非依存的な経路を介して分化、サイトカイン発現、細胞遊走が誘発されることがあり、T細胞シグナル伝達以外にも多様な機能を持つことが示されています。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• 本抗体は明るく光安定性の高い遠赤色蛍光色素で直接標識されており、フローサイトメトリーですぐに使用可能です。使用する細胞種と実験条件に応じて最適な染色濃度を決定するため、抗体の滴定を行ってください（典型的な範囲：1×10^6細胞あたり0.1～1 µg）。
• 静止状態のヘルパーT細胞ではCD4の表面発現が高いため、特異的な染色を確保するために適切なアイソタイプコントロールと生死細胞の判別を行ってください。マルチカラーパネルでは、抗CD3抗体・抗CD8抗体と組み合わせることで、T細胞サブセットを詳細に解析できます。
• 本抗体はヒトCD4とカニクイザルCD4の両方に交差反応するため、非ヒト霊長類モデルを用いた研究に適しています。細胞内染色を行う場合は、使用するサンプルマトリックスおよび固定/透過処理プロトコルでの検証を事前に行ってください。
• 免疫原は組換えヒトCD4であり、細胞外ドメインに対応する可能性が高いです。そのため、本抗体は天然の変性していないCD4を優先的に認識する可能性があり、還元条件下のウエスタンブロッティングなどの変性条件で使用する場合は事前の検証が必要となる場合があります。
• フローサイトメトリー以外の用途（免疫組織化学や免疫沈降など）では、メーカー側でのデータがないため、最適化と独立した検証を推奨します。

CamelBioについて：ワンストップソーシングブリッジ

CamelBioは、検証済みの抗体、抗原ペア、補助試薬を含む幅広いIVD原材料を提供することで、診断薬メーカーや研究機関を支援しています。本CD4抗体はT細胞の免疫表現型分類およびHIV関連研究に対応しており、ヒトおよびカニクイザルのサンプルで反応性が確認されていることから、トランスレーショナル免疫アッセイ開発に適しています。個々の試薬に加え、CamelBioは希少標的原材料の調達や大量のカスタムオーダーにも対応し、アッセイ設計から臨床検証までワークフロー全体の効率化をお手伝いします。