FC、ELISA用 抗CD45ウサギモノクローナル抗体 - P08575

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD45の機能と局在

• CD45は、白血球共通抗原（L-CA）またはT200としても知られ、免疫細胞シグナル伝達において重要な役割を果たす受容体型チロシンホスファターゼ（PTPRC）です。
• DPP4に結合すると、T細胞共刺激の正の調節因子として機能します。最初のPTPaseドメインは酵素活性を持ち、2番目のドメインは最初のドメインの基質特異性に影響を与えるようです。T細胞活性化時に、SKAP1とFYNをリクルートし脱リン酸化します。LYNを脱リン酸化し、それによりLYN活性を調節します。 関連参考文献： PMID:35767951
• CD45は、抗原提示細胞とT細胞の界面でCLEC10Aと相互作用し、T細胞活性化閾値の調節と自己反応性の防止に寄与します。
• 選択的スプライシングによるアイソフォーム（アイソフォーム1から8まで）は、胸腺細胞で異なる発現を示し、アイソフォーム1,2,3,5,7が検出され、他は検出されません。複数のタンパク質分子量（131–147 kDa）は、このアイソフォームの多様性を反映しています。
• 細胞内局在としては、CD45は細胞膜、膜ラフト、および免疫シナプスに局在し、近位T細胞受容体シグナル伝達における役割と一致しています。
• 宿主因子として、CD45はヒトサイトメガロウイルスタンパク質UL11の受容体として機能し、T細胞へのウイルス結合とそれに続くT細胞増殖およびシグナル伝達の障害を仲介します。
• 翻訳後修飾には、高度なグリコシル化、リン酸化、ならびにシグナルペプチド、膜貫通ヘリックス、タンデムホスファターゼドメインの存在が含まれます。
• すべての有核造血細胞に広く発現しており、CD45はリンパ球の発生と活性化に必須であり、白血球同定のための重要な診断マーカーとなっています。

実験ガイドと技術的ヒント

• 使用した免疫原（アミノ酸26–577）は、ヒトCD45の細胞外領域をカバーしており、複数のアイソフォーム特異的ドメインを含みます。この広い領域は、本抗体が天然構造の様々なCD45アイソフォームを認識する可能性があることを示唆しています。
• フローサイトメトリー（FC）では、関連するヒト白血球サブセット（例：PBMC、Jurkat細胞）で抗体の希釈系列を作成し、最適な染色濃度を決定してください。非特異的結合を評価するためにアイソタイプコントロールを含めてください。
• ELISA応用では、組換えCD45タンパク質または細胞溶解物を用いた直接法または捕捉法を評価してください。標準曲線を用いて直線性と感度を確認してください。
• CD45は高度にグリコシル化されているため、特定のサンプルタイプでグリコシル化による抗体結合が妨げられないことを確認してください。変性条件はエピトープへのアクセス性に影響を与える可能性があります。
• 本抗体は保冷状態で供給されます。安定性を維持し、凍結融解の繰り返しを避けるために、推奨温度（例：-20°C）で分注・保存してください。

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