IF/ICC、IHC-P、FC、ELISA用抗CD45ウサギモノクローナル抗体 - P06800

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD45の機能と局在

• CD45は、白血球共通抗原（L-CA）、Ly-5、またはT200としても知られ、マウスではPtprc遺伝子にコードされる受容体型チロシンプロテインホスファターゼCです。分子量約145 kDaの膜貫通型糖タンパク質です。
• CD45は、抗原受容体を介したT細胞の活性化に不可欠です。DPP4への結合を介して、T細胞の共活性化を促進する正の調節因子として機能します。
• 細胞内領域には、タンデムに並んだ2つのタンパク質チロシンホスファターゼ（PTP）ドメインが含まれています。第1ドメインは触媒活性を持ち、第2ドメインは基質特異性を調節します。
• T細胞の活性化時、CD45はSKAP1やFYNなどのシグナル伝達分子を動員して脱リン酸化し、さらにLYNも脱リン酸化してその活性を調節します。
• CD45は、抗原提示細胞とT細胞の接触部位でCLEC10Aと相互作用します。この相互作用は、エフェクターT細胞上のTn抗原を担持するCD45と未成熟樹状細胞上のCLEC10Aによって媒介され、自己反応性を防ぐためにT細胞活性化閾値の調整に寄与します。
• このタンパク質は、近位シグナル伝達における役割と一致して、細胞膜、膜ラフト、免疫シナプスに局在します。翻訳後修飾には、選択的スプライシングとリン酸化が含まれます。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はマウスCD45のアミノ酸26～566（細胞外領域）に対応しており、この抗体は細胞外エピトープを認識する可能性が高いことを示しています。そのため、透過処理を行わない生細胞染色やフローサイトメトリーに適しています。
• 免疫蛍光法（IF/ICC）および免疫組織化学法（IHC-P）では、固定条件（例：4% PFA）の最適化を検討し、必要に応じて、エピトープの完全性を維持しながら抗体のアクセス性を確保するため、穏やかな透過処理を行ってください。
• フローサイトメトリー（FC）を実施する際は、使用するマウス細胞種に適した最適濃度を決定するために抗体を滴定し、適切なアイソタイプコントロールを含めてください。
• この抗体はマウスサンプルでの使用についてバリデーション済みです。他種との交差反応性は報告されていません。必要に応じて、ご使用の系で確認してください。

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