WB、ELISA用 抗CD59ウサギモノクローナル抗体 - P13987

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：CD59の機能と局在

• CD59糖タンパク質（プロテクチン、HRF20、MACIF、MIRLとも呼ばれる）は、主にヒト細胞に発現するGPIアンカー型細胞表面糖タンパク質であり、補体介在性溶解から細胞を保護します。
• 補体膜侵襲複合体（MAC）の強力な阻害剤として機能し、孔形成の最終段階をブロックすることで補体活性化時の損傷を防ぎます。 関連参考文献： PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111
• 機構的には、CD59は組み立て中のMACのC8αおよびC8β成分のβヘアピン領域に結合し、分子間βシートを形成することで、浸透圧性孔形成に必要な複数のC9分子の取り込みを防ぎます。 関連参考文献： PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:36797260
• 尿やその他の体液中に存在する可溶性CD59は、補体結合活性は保持していますが、膜結合型と比較してMAC阻害能は大幅に低下しています。
• 細胞内では、CD59はGPI部分を介して細胞膜に固定されており、分泌型としても見られます。
• このタンパク質は、安定性と機能に寄与する複数のジスルフィド結合と糖化部位を含む重要な構造的特徴を持っています。
• CD59の遺伝子変異は遺伝性溶血性貧血と関連しており、赤血球を補体攻撃から保護するその重要な役割を強調しています。
• 選択的スプライシングにより、CD59の複数のアイソフォームが産生され、その機能や局在が調節される可能性があります。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 本抗体の免疫原は、ヒトCD59のアミノ酸49–128にまたがる合成ペプチドであり、細胞外領域を標的としているため、天然の膜結合型を検出するのに適しています。
• ウェスタンブロットでは、非糖鎖化ペプチドバックボーンに対して約14 kDaの主バンドが予想されます。ただし、糖鎖化とGPIアンカーの付加により、より高分子量の種が生じる可能性があるため、適切な陽性対照（例：ヒト血清または赤血球膜）で検証してください。
• ELISAアプリケーションでは、CD59の定量化のための高感度サンドイッチ免疫測定法を開発するために、異なるエピトープを標的とする別のクローンと本モノクローナル抗体を組み合わせることを検討してください。
• 特異性を確保し、バックグラウンドを最小限に抑えるために、関連するサンプルマトリックスで常に抗体希釈率と実験条件を最適化してください。

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