WB、IHC-P、ELISA用抗CD62P/P-セレクチンウサギポリクローナル抗体 - P16109

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD62P/P-セレクチンの機能と局在

• CD62P/P-セレクチン（SELP遺伝子によりコードされる）は、E-セレクチンおよびL-セレクチンとともにセレクチンファミリーに属する、Ca²⁺依存性の接着受容体です。
• PSGL-1（SELPLG）などの糖タンパク質上に存在するシアリルLewis X糖鎖に結合することで、活性化内皮または血小板上における白血球の初期係留およびローリングを媒介します。
• P-セレクチンは、インテグリンα-IIb/β3（ITGA2B:ITGB3）およびα-V/β-3（ITGAV:ITGB3）との相互作用を介して、安定した細胞接着およびシグナル伝達にも寄与します。 関連文献： PMID:37184585
• このタンパク質は主に血小板のα顆粒および内皮細胞のWeibel-Palade小体に貯蔵されています。トロンビンやヒスタミンなどのアゴニストによって細胞が活性化されると、速やかに細胞膜へ移行します。
• 細胞内局在の観点では、P-セレクチンはI型シングルパス膜貫通タンパク質であり、N末端のレクチンドメインが細胞外空間に面し、短い細胞質テールを有します。
• 主な構造的特徴には、N末端C型レクチンドメイン、EGF様ドメイン、一連のsushi（CCP）リピート、膜貫通ヘリックス、パルミトイル化された細胞質テールが含まれます。
• N型糖鎖付加、ジスルフィド結合、パルミトイル化などの翻訳後修飾は、適切なフォールディング、輸送および機能に不可欠です。
• P-セレクチンは、炎症、血栓症、がん転移において中心的な役割を果たすため、重要なバイオマーカーおよび治療標的となっています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原（ヒトP-セレクチンのアミノ酸30～200）は、N末端レクチンドメインおよびEGF様ドメインをカバーしています。これらの領域は免疫原性が高く、ネイティブ条件および変性条件のいずれにおいても抗体結合にアクセスしやすい部位です。
• ウエスタンブロット（WB）では、予測分子量は約91 kDaですが、糖鎖付加などの翻訳後修飾により、見かけの分子量が高くなる場合があります。還元条件を使用し、活性化血小板や内皮細胞など、P-セレクチンの発現が確認されている細胞溶解液でバリデーションを行ってください。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、P-セレクチンの発現は通常、静止状態の組織では低い傾向があります。抗原賦活化法の使用を検討し、炎症組織または血栓組織の切片などの陽性対照を含めてください。
• ELISA用途では、このポリクローナル抗体を捕捉試薬または検出試薬として使用できます。特異性を高めるため、サンドイッチELISA形式では適切なモノクローナル抗体と組み合わせてください。
• ポリクローナル抗体であるため、定量アッセイに使用する場合はロット間の一貫性を確認してください。活性を維持するため、分注して-20°Cで保存することを推奨します。

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