WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用 抗CD63ポリクローナル抗体 - P08962

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：CD63の機能と局在

• CD63は、granulophysin、LAMP-3、Limp1、ME491、OMA81H、Tspan-30としても知られ、4つの膜貫通ドメインと2つの細胞外ループを特徴とするテトラスパニンスーパーファミリーの一員です。
• これはTIMP1の細胞表面受容体として機能し、ITGB1を介したインテグリンシグナル伝達を含むシグナルカスケードの活性化に中心的な役割を果たし、AKT、FAK/PTK2、MAPキナーゼの活性化を導き、細胞生存、接着、伸展、遊走を促進します。
• CD63は細胞内小胞輸送に関与し、メラノサイトの発生と成熟に重要なPMELルミナルドメインの正常な輸送に必須です。
• SELPの輸送を調節することで白血球の内皮細胞への接着を調節し、Ms4a2/FceRI刺激を介した肥満細胞の脱顆粒にも役割を果たす可能性があります。
• 細胞内局在に関して、CD63は主にリソソーム膜および後期エンドソーム膜に存在しますが、多胞体、メラノソーム、分泌された細胞外エクソソーム、細胞表面にも見られます。
• このタンパク質は高度にグリコシル化およびパルミトイル化されており、これらの特徴はその輸送と機能に重要であり、血小板、造血細胞、組織マクロファージ、メラノーマ細胞で異なる発現を示します。
• 選択的スプライシングによりCD63のアイソフォームが生成され、これらは異なる機能と局在を持つ可能性があります。
• CD63に関連するキーワードには、糖タンパク質、リポタンパク質、膜、タンパク質輸送、分泌があり、細胞過程におけるその多様な役割を反映しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトCD63のアミノ酸103–203に対応し、大きな細胞外ループの一部にまたがる領域です。この設計により、フルレングスタンパク質と潜在的な切断産物の両方を認識できる可能性があります。関連するサンプルシステムで検証してください。
• ウェスタンブロットでは、CD63が高度にグリコシル化されているため、見かけの分子量が予測される26 kDaよりも大きくなる可能性があることを考慮してください。適切なタンパク質の脱グリコシル化を確保するか、陽性対照を使用してバンドの同一性を確認してください。
• 本抗体はIHC-PおよびIF/ICCに適しています。特にCD63がエンドソームやリソソームに細胞内局在することを考慮し、抗原賦活化と透過化の条件を最適化してください。
• ELISAでは、タンパク質の立体構造や翻訳後修飾によって結合が影響を受ける可能性があるため、特定のアッセイ形式で組換えまたは天然のCD63を用いて抗体の性能を評価してください。
• CD63発現はエクソソームで上昇しています。したがって、適切に検証された場合、この抗体はエクソソームの分離または特性解析研究に有用である可能性があります。

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