Anti-CD68 ウサギモノクローナル抗体（WB, IF-P, FC (intra), ELISA対応） - P34810

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD68の機能と局在

• CD68（マクロシアリン、GP110、LAMP4、SCARD1としても知られる）は、リソソーム関連膜タンパク質（LAMP）ファミリーに属する高度に糖鎖修飾されたI型膜貫通タンパク質です。
• 主にエンドソームおよびリソソーム膜に局在していますが、細胞表面へ再循環し、マクロファージにおける迅速な形質膜提示を可能にします。
• このタンパク質は貪食において重要な役割を果たし、取り込んだ物質の細胞内リソソーム代謝を仲介するとともに、病原体や他の細胞との細胞外相互作用にも関与します。
• CD68は組織や臓器特異的なレクチンまたはセレクチンに結合し、これにより特定の解剖学的部位へのマクロファージサブセットのホーミ再（帰巣）を促進し、マクロファージの接着と遊走を支援します。
• エンドソームやリソソームから形質膜へのCD68の迅速な再循環は、セレクチンを発現する基質や他の細胞上をマクロファージが這い移動する（クロールする）のを助けると考えられています。
• 血液中の単球や組織マクロファージで強く発現していますが、リンパ球、線維芽細胞、内皮細胞、および多くの腫瘍細胞株でも検出され、そこでは血管セレクチンへの結合を通じて腫瘍細胞の散布（播種）を促進する可能性があります。
• このタンパク質は、複数のN末端ムチン様ドメイン、単一の膜貫通ヘリックス、短い細胞質テールを特徴とし、広範なN-およびO-糖鎖修飾と複数の分子内ジスルフィド結合を有しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原は、ヒトCD68 (NP_001242.2) の残基100～200にまたがる合成ペプチドです。この領域の配列保存性が、マウスおよびラットとの交差反応性の基礎である可能性があります。
• ウェスタンブロット（WB）の場合、非糖鎖修飾バックボーンの予測分子量は約37 kDaですが、高度に糖鎖修飾された型は、見かけ上より高い分子量（80～110 kDa）で移動することがよくあります。適切なブロッキングと分子量マーカーの使用が推奨されます。
• 免疫蛍光（IF-P）および細胞内フローサイトメトリー（FC）では、CD68は主にエンドソームおよびリソソーム区画に存在するため、透過処理が不可欠です。表面染色を行う場合は、再循環の動態を考慮する必要があります。
• ELISAの性能はエピトープのアクセシビリティに依存します。高度な糖鎖修飾が抗体結合を隠蔽または改变する可能性があるため、マトリックス効果とコーティング条件を最適化する必要があります。
• 単球/マクロファージ系譜での広範な発現を考慮し、適切なポジティブコントロール（THP-1またはRAW 264.7細胞など）とアイソタイプコントロールを含め、目的のサンプル系における特異性を確認してください。

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