WB、IF/ICC、ELISA用抗CD68ウサギポリクローナル抗体 - P34810

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD68の機能と局在

• CD68はマクロシアリン、GP110、LAMP4、SCARD1としても知られ、LAMPファミリーに属する高度に糖鎖修飾された膜貫通糖タンパク質です。
• 主にエンドソームおよびリソソームの膜上に発現しますが、細胞表面へ迅速にリサイクルされることもあり、接着および細胞運動に関与することが示唆されています。
• CD68はマクロファージの貪食活性において機能し、細胞内リソソーム代謝と、細胞外での細胞間相互作用および細胞と病原体の相互作用の双方に関与します。
• 組織および臓器特異的なレクチンまたはセレクチンに結合することで、CD68はマクロファージサブセットの特定の解剖学的部位へのホーミングを促進します。
• このタンパク質にはムチン様ドメインが含まれており、リガンド結合に関与すると考えられています。また、内皮細胞上のセレクチンへの接着を媒介し、マクロファージおよび腫瘍細胞の播種を促進する可能性があります。
• CD68は血中単球および組織マクロファージで高発現しており、リンパ球、線維芽細胞、内皮細胞、ならびにさまざまな腫瘍細胞株にも発現しています。
• N結合型糖鎖付加やジスルフィド結合など、複数の翻訳後修飾が構造安定性と分子量に寄与しています。その結果、分子量は約110 kDa（成熟糖鎖修飾型）まで変化しますが、予測されるコアタンパク質は約37 kDaです。
• 選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成され、それぞれ異なる機能または発現パターンを有する可能性があります。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原（アミノ酸16～200に相当する組換えタンパク質）はN末端細胞外領域を標的とするため、本抗体はコアタンパク質と成熟糖鎖修飾型の両方を認識する可能性があります。
• ウェスタンブロット（WB）では、還元条件と非還元条件の両方を試験することが推奨されます。観察されるバンドは、サンプルおよび実験条件に応じて、37 kDa（コアタンパク質）から110 kDa（糖鎖修飾型）の間を移動する可能性があります。
• 免疫蛍光／免疫細胞化学（IF/ICC）では、エンドソーム、リソソーム、細胞膜に一致する染色パターンが予想されます。固定および透過化のプロトコルは、細胞種に応じて最適化してください。
• ELISAで使用する場合は、適切なコーティングおよびブロッキング条件が必要になることがあります。サンドイッチアッセイでは、適切な検出抗体との組み合わせを検討してください。
• 関連する種（ヒト、マウス、ラット）および適切な陽性対照サンプルで抗体を検証してください。陽性対照としては、マクロファージ細胞株（例：THP-1、RAW 264.7）または末梢血単核細胞などが挙げられます。

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