ウエスタンブロット、IHC-P、IF/ICC、ELISA用 抗CD73/NT5E ウサギポリクローナル抗体 - P21589

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：CD73/NT5Eの機能と局在

• CD73/NT5Eは、エクト-5'-ヌクレオチダーゼをコードする。これは、細胞外ヌクレオチド一リン酸を対応するヌクレオシドと無機リン酸に加水分解する反応を触媒する、グリコシルホスファチジルイノシトール（GPI）アンカー型膜タンパク質である。
• AMPをアデノシンと無機リン酸に加水分解する反応を触媒し、デオキシリボース型よりもリボヌクレオチド一リン酸を優先的に基質とする（PubMed:21933152, PubMed:22997138, PubMed:23142347, PubMed:34403084）。 関連文献:
• PMID:21933152
• PMID:22997138
• PMID:23142347
• PMID:34403084
• IMP、UMP、GMP、CMP、dAMP、dCMP、dTMP、NAD、NMNなど、広範な基質特異性を示す（PubMed:21933152, PubMed:22997138, PubMed:23142347）。 関連文献:
• PMID:21933152
• PMID:22997138
• PMID:23142347
• C末端のGPIアンカーを介して細胞膜に局在し、活性部位を細胞外側に配置することで、プリン作動性シグナル伝達と免疫応答を調節する。
• 触媒活性には亜鉛が補因子として必要であり、酵素はリン酸加水分解に必須の二核亜鉛中心を含む。
• 翻訳後修飾にはN結合型グリコシル化とジスルフィド結合形成が含まれ、タンパク質の安定性と機能に寄与する。
• NT5Eの遺伝的変異は、稀な常染色体劣性疾患であるCD73欠損症による動脈石灰化（ACDC）と関連している。

実験ガイドと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトNT5Eの残基27–377に対応しており、細胞外ドメインの大部分をカバーしている。この設計は、天然の立体構造を持つ細胞表面CD73の検出に有利である。
• ウエスタンブロット（WB）では、1:500–1:2000の希釈範囲を検討し、予測分子量は約63 kDaであることに留意する。還元条件下では、グリコシル化された形態はやや高分子量で現れる可能性がある。
• 免疫組織化学（IHC-P）および免疫蛍光（IF/ICC）では、クエン酸緩衝液（pH 6.0）を用いた抗原賦活化が有効な場合が多い。陽性および陰性対照組織のパネルで検証すること。
• マウスおよびラットとの交差反応性は実証されているが、種特異的な配列変異を考慮し、各アッセイにおける最適な使用希釈率は経験的に決定する必要がある。
• ポリクローナル抗体であるため、ロット間の均一性は変動する可能性がある。新しいロットごとに力価を決定し、すべての実験に適切な陽性および陰性対照を含めることを推奨する。
• ELISAでは、組換えタンパク質の直接コーティング法またはキャプチャー・検出法を検討することができる。信号対雑音比を最適化するためにチェッカーボード法による力価決定を行うこと。

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CamelBioは、IVDメーカーおよび研究機関に、検証済み抗体ペア、組換えタンパク質、補助試薬を含む高品質原料の包括的なサプライチェーンを提供します。CD73/NT5Eポリクローナル抗体は、プリン作動性シグナル伝達、アデノシン代謝、免疫調節を研究するワークフローに適合します。大量調達、カスタムコンジュゲーション、希少ターゲット試薬の調達にお困りなど、概念から臨床応用まで、調達プロセスを効率化する方法について、CamelBioにご相談ください。