WB、IHC-P、ELISA用抗CD8Aポリクローナル抗体 - P01732

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：CD8Aの機能と局在

• CD8A遺伝子は、MHCクラスI分子の共受容体であるT細胞表面糖タンパク質CD8のα鎖をコードしており、T8/Leu-2とも呼ばれます。CD8タンパク質は、α鎖(CD8A)とβ鎖(CD8B)のジスルフィド結合で連結されたヘテロ二量体、または稀にCD8Aのホモ二量体として存在します。
• CD8Aは免疫応答に不可欠です。T細胞においては、抗原提示細胞上のT細胞受容体(TCR)およびMHCクラスI:ペプチド複合体と相互作用し、SrcキナーゼLCKを動員することでシグナル伝達経路を開始し、T細胞の活性化・増殖・細胞傷害性Tリンパ球(CTL)への分化を誘導します。
• CD8AはCTLが感染細胞や腫瘍細胞を認識・排除する働きを担っています。CD8A-LCKのリン酸化によって引き起こされる細胞内シグナル伝達カスケードは、リンホカイン産生、細胞運動性、接着、標的細胞の溶解を促進します。
• ナチュラルキラー(NK)細胞上では、CD8Aホモ二量体が生存機構を提供し、複数の標的細胞との結合および溶解を促進します。またCD8Aホモ二量体は、活性化リンパ球がメモリーCD8+T細胞へと生存・分化することを支持します。
• CD8Aは胸腺由来T細胞、NK細胞の亜集団、メモリーT細胞、上皮内リンパ球、単球、樹状細胞に発現しています。単純ヘルペスウイルス1型刺激により、形質細胞様樹状細胞での発現が誘導されることがあります。
• このタンパク質は、1回貫通型の膜貫通ドメインを持つ膜貫通糖タンパク質であり、選択的スプライシングによって分泌型も生成されます。免疫グロブリン様ドメインを含み、ジスルフィド結合、パルミトイル化、N結合型グリコシル化によって修飾されています。
• CD8Aに関連するキーワードとしては、適応免疫、選択的スプライシング、細胞膜、疾患変異（免疫不全との関連）、ジスルフィド結合、糖タンパク質、免疫グロブリンドメイン、リポタンパク質、パルミチン酸、分泌型、膜貫通ヘリックスなどがあります。
• 成熟タンパク質の分子量は約25.7 kDaであり、ウェスタンブロット分析の還元条件下で観察される26 kDaのバンドサイズと一致しています。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• 本ポリクローナル抗体の作製に使用された免疫原は、ヒトCD8Aのアミノ酸22-182番に対応し、細胞外の免疫グロブリン様ドメインを含んでいます。この領域は細胞表面からアクセス可能である可能性が高いため、天然型タンパク質を認識する用途にも本抗体は適しています。
• ウェスタンブロット(WB)では、26 kDa付近にバンドが予想されます。本抗体はグリコシル化型と非グリコシル化型の両方を検出できる可能性があります。モノマーを分離するために、還元条件での実施が推奨されます。
• パラフィン包埋切片での免疫組織化学(IHC-P)では、最適な抗原回収条件（例：クエン酸緩衝液pH 6.0）は実験的に決定する必要があります。ポリクローナル抗体であるため強いシグナル増幅が得られる可能性がある一方、バックグラウンドが上昇する可能性もあるため、ブロッキング工程の最適化を行ってください。
• ポリクローナル抗体として複数のエピトープを認識するため、ELISAアッセイに有利であり、捕捉試薬と検出試薬の両方として使用できる可能性があります。マウスタンパク質に対する交差吸着を行っているため、マウスCD8Aとの反応性が確保されており、マウスモデルの研究でも利用範囲が広がっています。

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